Clusterin和CR1蛋白在腦淀粉樣血管病中的表達及其在治療中的作用.pdf

1、第一部分：Clusterin蛋白對腦淀粉樣血管病治療的作用
　　研究目的：調節(jié)腦內Clusterin蛋白的表達，觀察是否能減少P淀粉樣蛋白（P-amyloid protein，A P)聚集體的沉積，改善腦淀粉樣血管病(Cerebral amyloid angiopathy，C A A)。
　　研究方法：用人工合成Clusterin活性肽鏈113-122片段，通過微泵持續(xù)滴注（2周）至APP-PS1轉基因小鼠（Tg6799)的

2、側腦室后，采用水迷宮實驗測試小鼠的行為學改變，通過酶聯免疫吸附實驗（Enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)檢測APP-PS1轉基因小鼠腦內AP40和AP42的水平，通過免疫組化觀察APP-PS1轉基因小鼠的C A A的表達變化，通過Western-Blot檢測低密度脂蛋白受體相關蛋白2(Low density lipoprotein receptor related protein，L R P

3、2)的變化，探索 Clusterin活性肽鏈治療CAA的作用及其可能機制。
　　研究結果：注射人工合成Clusterin活性肽鏈113-122片段后的APP-PS1轉基因小鼠的水迷宮行為學實驗較對照組有明顯改善，AP40和AP42水平也顯著減少，免疫組化顯示C A A的嚴重程度也有顯著改善。此外，注射人工合成Clusterin活性肽鏈113-122片段后，免疫印跡法（Western-Bolt)顯示APP-PS1轉基因小鼠的L R

4、P2蛋白表達顯著增加，提示Clusterin活性肽鏈可能通過L R P2受體起到治療C A A的作用。
　　研究結論：腦室持續(xù)滴注Clusterin活性肽鏈可以減少APP-PS1轉基因小鼠的AP40和A P42的沉積，從而改善APP-PS1轉基因小鼠的C A A的血管病變和記憶障礙，而L R P2受體可能參與了 Clusterin活性肽鏈的作用。這些研宄結果為治療C A A提供了重要依據。
　　第二部分： I型補體受體（CR

5、1)蛋白在腦淀粉樣血管病中的表達
　　研究目的：觀察 I型補體受體(Complement receptor，CR)蛋白在腦淀粉樣血管病中的表達。
　　研究方法：以APP-PS1轉基因小鼠（Tg6799)為動物模型，取小鼠海馬及腦葉組織，分別用western-bolt和E L I S A兩種方法腦組織中的C R1蛋白進行定量檢測，觀察CR1的表達變化。此外，用多聚甲醛腦灌注固定腦組織后，用免疫熒光進行CR1和血管內皮標記物（C

6、D31)、A P共定位，觀察C R1蛋白在血管中的表達變換，及其與AP的定位關系。
　　研究結果：Western-bolt和酶聯免疫吸附實驗（E L I S A)顯示C R1蛋白在APP-PS1轉基因小鼠的表達明顯高于正常小鼠。以血管內皮標記物（CD31)為標記，免疫熒光顯示C R1蛋白在APP-PS1轉基因小鼠的血管中表達呈顆?；驁F塊狀。以A P為標記，檢測CR1蛋白在CAA內皮細胞中的表達。
　　研究結論：CR1可能在腦