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文檔簡介
1、目的:探討甲醛對小鼠肝臟 miRNA-21及其下游蛋白磷酸酯酶與張力蛋白同源物基因蛋白(Phosphatase and Tensin Homolog,PTEN)、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-3(the tissue inhibitors of metalloproteinase3,TIMP-3)、伴有Kazal基序富含半胱氨酸的逆轉(zhuǎn)誘導(dǎo)蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Ka
2、zal motifs,RECK)的影響。
方法:取生命健康狀況良好的雌性昆明小鼠40只,采用隨機(jī)分組的方法,將其分為4個組(高濃度甲醛染毒組、中濃度甲醛染毒組、低濃度甲醛染毒組和生理鹽水對照組),每組10只。每日上午10:00給予甲醛染毒組腹腔注射不同濃度的甲醛溶液,給予對照組注射等量的生理鹽水,持續(xù)30天。應(yīng)用實時熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測4組小鼠肝組織中miRNA-21的表達(dá)情況,同時用Western
3、blot、免疫組織化學(xué)二步法檢測4組小鼠肝組織中PTEN、TIMP-3、RECK蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:低濃度甲醛染毒組、中濃度甲醛染毒組、高濃度甲醛染毒組中的miRNA-21相對于生理鹽水對照組的表達(dá)量分別是1.16±0.18、1.61±0.29、2.48±0.49,組間有明顯差異(F=38.02,P﹤0.0001)。生理鹽水對照組、低濃度甲醛染毒組、中濃度甲醛染毒組、高濃度甲醛染毒組中的PTEN蛋白的相對表達(dá)量分別是1.4
4、4±0.057、1.15±0.054、0.81±0.025、0.62±0.065,組間有明顯差異(F=145.4,P﹤0.0001)。生理鹽水對照組、低濃度甲醛染毒組、中濃度甲醛染毒組、高濃度甲醛染毒組中的TIMP-3蛋白的相對表達(dá)量分別是1.30±0.058、1.04±0.083、0.85±0.070、0.23±0.067,組間有明顯差異(F=125.8,P﹤0.0001)。生理鹽水對照組、低濃度甲醛染毒組、中濃度甲醛染毒組、高濃度甲
5、醛染毒組中的RECK蛋白的相對表達(dá)量分別是1.24±0.057、1.11±0.056、0.68±0.042、0.35±0.066,組間有明顯差異(F=158.7,P﹤0.0001)。隨著染毒溶液濃度的增加,miRNA-21相對表達(dá)量與 PTEN相對表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.919,P=0.081),與 TIMP-3相對表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.990,P=0.01),與RECK相對表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.974,P=0.026)。
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