炭疽桿菌毒力大質(zhì)粒的驅(qū)除及比較蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、炭疽芽孢桿菌引發(fā)的炭疽病是一種烈性的人畜共患的傳染病,危害性極強。尤其近些年,國際上一些恐怖分子利用炭菌桿菌的芽孢制造的恐怖事件,嚴重干擾了人們的日常生活及社會經(jīng)濟秩序。因此,對其進行研究具有一定的理論價值和潛在的社會效益。
　　 在本研究中,運用質(zhì)粒不相容性原理,分別以炭疽桿菌A16R與A16作為實驗的出發(fā)菌株,構(gòu)建了pXO1質(zhì)粒缺失突變株A16RPI1和pXO2質(zhì)粒缺失突變株A16PI2。對菌株A16RPI1與A16RP及A

2、16PI2與A16R在生長趨勢、糖代謝等方面進行了比較,并鑒定了A16PI2的莢膜生成能力;分別制備了A16RPI1與A16RP的23 h的全菌蛋白質(zhì)樣品和A16PI2與A16R的20 h的全菌蛋白質(zhì)樣品,通過pH4-7梯度的雙向電泳找出差異蛋白,并對差異蛋白點進行了質(zhì)譜檢測分析。得到了以下主要結(jié)果:
　　 1)菌株A16RPI1與菌株A16RP的生長趨勢基本一致,且二者的糖代謝也無區(qū)別。
　　 2)菌株A16PI2與菌

3、株A16R的生長趨勢也是一致的,但二者的糖代謝情況稍有不同,A16PI2可以代謝果糖但是A16R卻不能代謝果糖。經(jīng)過莢膜培養(yǎng)實驗驗證,A16PI2確實不能生成莢膜。
　　 3)菌株A16RPI1與菌株A16RP穩(wěn)定期蛋白質(zhì)在pH4-7這一梯度有5個差異蛋白,這些蛋白都定位在細胞質(zhì)中,主要是翻譯過程中的延伸因子和與氨基酸代謝相關(guān)的酶。
　　 4)菌株A16PI2與菌株A16R穩(wěn)定期蛋白質(zhì)在pH4-7這一梯度有22個差異蛋白