MicroRNA-7調控在IL-1β誘導的髓核細胞外基質退變中的作用研究.pdf

1、在椎間盤退變的過程中，IL-1β引起的細胞外基質退變的機制尚不明確。近幾年的研究表明，microRNA與椎間盤退變有關，但是它在髓核組織細胞外基質退變中的作用仍不清楚。本研究的目的是研究mir-7在IL-1β引起的椎間盤退變中的表達及作用。
　　首先，以定量即時聚合酶鏈式反應檢測mir-7在退變的髓核組織以及IL-1β處理后的髓核細胞中的表達程度。運用miRNAs網上數據庫和計算機分析預測mir-7的靶蛋白，以雙熒光素酶報告系統(tǒng)和

2、Western分析檢測mir-7與潛在靶蛋白3-UTRs的作用，驗證GDF5是否為miR-7的一個靶基因。最后，測定基質組分及基質降解酶的mRNA和蛋白表達水平，闡明miR-7在IL-1β誘導椎間盤退變過程中的作用。
　　本研究，我們發(fā)現與對照組相比，miR-7在人退變的髓核組織以及在IL-1β處理后的髓核細胞中表達升高。我們也驗證GDF5是miR-7的一個靶基因。在人類髓核細胞中，miR-7過表達導致GDF5 mRNA和蛋白的減

3、少，然而下調miR-7則能引起GDF5mRNA和蛋白的過表達。熒光素酶報告分析證實miR-7直接靶向調控GDF5。功能分析表明過表達miR-7顯著增強IL-1β引起的collagenⅡ和aggrecan表達減少以及mmp-13和ADAMTS4表達的上調，而下調miR-7顯著逆轉IL-1β引起的髓核細胞退變進程。另外地，沉默miR-7逆轉IL-1β誘導髓核細胞外基質退變的作用能夠被siGDF5減弱。
　　綜上所述，這些研究表明miR