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1、目的:乳酸桿菌廣泛存在于人體黏膜表面,是構(gòu)成菌群的重要細(xì)菌。但乳酸桿菌在體內(nèi)的生理和病理作用尚不完全清楚。本研究通過檢測(cè)胃炎組、腸化組和胃癌組胃黏膜乳酸桿菌的陽性率及種類分布,分析胃黏膜乳酸桿菌在胃癌癌變過程中的變化,通過分析乳酸桿菌與致癌相關(guān)因素幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)感染及胃黏膜菌群的相關(guān)性,進(jìn)一步探討胃黏膜乳酸桿菌在胃癌癌變過程中所起作用。
方法:
?。?)收集160例患者(包括
2、71例胃炎、44例腸化和45例胃癌)的胃竇黏膜活檢標(biāo)本,病理組織學(xué)檢測(cè)Hp,進(jìn)行胃黏膜乳酸桿菌分離培養(yǎng),提取細(xì)菌DNA,PCR擴(kuò)增16s rRNA基因片段,PCR產(chǎn)物測(cè)序,16s rRNA鑒定細(xì)菌種類,測(cè)定不同疾病胃黏膜中乳酸桿菌的種類分布和陽性率。
?。?)收集130例慢性胃炎患者胃竇黏膜標(biāo)本,病理組織學(xué)檢測(cè)Hp,提取胃黏膜基因組DNA,應(yīng)用熒光定量PCR對(duì)胃黏膜乳酸桿菌和總細(xì)菌進(jìn)行定量分析。
結(jié)果:
?。?
3、)從160例患者中共分離出乳酸桿菌63株,分屬11種乳酸桿菌。其中L.mucosae,L.crispatus和L.oris首次從人體胃黏膜中分離獲得。胃癌患者胃黏膜中乳酸桿菌種類達(dá)9種,明顯多于胃炎患者和腸化患者。
?。?)160例患者中62例胃黏膜組織中乳酸桿菌陽性,平均陽性率為38.4%;胃炎組、腸化組和胃癌組乳酸桿菌陽性率呈逐漸升高趨勢(shì),分別為24.7%(18/71)、38.6%(17/44)和60.0%(27/45),胃
4、癌患者乳酸桿菌陽性率明顯高于胃炎組和腸化組(P<0.05)。
?。?)160例患者中,63例患者Hp陽性(39.4%)。盡管 Hp感染者乳酸桿菌陽性率(43.8%)高于Hp未感染者(35.4%),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
(4)對(duì)130例慢性胃炎患者胃黏膜基因組DNA進(jìn)行熒光定量PCR,130例患者胃黏膜總細(xì)菌數(shù)(Log)的平均值為7.63±0.70,即胃黏膜總細(xì)菌數(shù)約為4.27×107個(gè)拷貝/μg胃黏膜D
5、NA;乳酸桿菌陽性者和陰性者胃黏膜總細(xì)菌數(shù)(Log)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),乳酸桿菌細(xì)菌數(shù)(Log)與胃黏膜總細(xì)菌數(shù)(Log)無顯著相關(guān)性(P>0.05)。Hp感染組和非感染組的乳酸桿菌檢出率和乳酸桿菌數(shù)(Log)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:
?。?)L.mucosae,L.crispatus和L.oris首次從人體胃黏膜中分離獲得。
?。?)胃癌患者胃黏膜乳酸桿菌的陽性率和種類均明顯
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