帕金森病執(zhí)行功能障礙與多巴胺能通路遺傳易感性的研究.pdf

1、背景：帕金森?。?Parkinson’s disease, PD）是由于黑質(zhì)致密部多巴胺（dopamine, DA）能神經(jīng)元變性導(dǎo)致的一種神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。臨床主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)遲緩、靜止性震顫、肌張力增高及姿勢(shì)步態(tài)異常等。近年來，隨著研究的不斷深入，PD非運(yùn)動(dòng)癥狀也備受關(guān)注，包括認(rèn)知功能障礙、嗅覺減退甚至喪失、情感及精神障礙、睡眠及自主神經(jīng)受累等，這些非運(yùn)動(dòng)癥狀嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，增加家人及社會(huì)的負(fù)擔(dān)，甚至成為患者死亡的危險(xiǎn)因素。

2、r>　　在PD非運(yùn)動(dòng)癥狀中，18.9％-52%的PD患者可發(fā)生認(rèn)知功能障礙，PD認(rèn)知功能障礙包括了輕度認(rèn)功能障礙（ Mild cognitive impairment in parkinson’s disease, PD-MCI）及癡呆（Parkinson’s disease dementia, PDD）。PD-MCI包括有執(zhí)行功能、注意力和工作記憶、語言、記憶以及視空間障礙5個(gè)認(rèn)知領(lǐng)域功能障礙，其中以執(zhí)行功能障礙較為突出。有研究發(fā)現(xiàn)執(zhí)

3、行功能障礙占PD-MCI的10.1%。伴有執(zhí)行功能障礙的PD患者在日常生活中完成復(fù)雜任務(wù)能力有所下降，顯著降低了患者的生活質(zhì)量。因此，早期發(fā)現(xiàn)執(zhí)行功能障礙，早期予以積極治療，可以提高患者的生活質(zhì)量，減輕家人及社會(huì)的負(fù)擔(dān)。
　　目前，關(guān)于PD執(zhí)行功能障礙的發(fā)生機(jī)制并不十分明確。其中，Kehagia等認(rèn)為PD認(rèn)知功能障礙有兩條神經(jīng)遞質(zhì)傳導(dǎo)通路，而PD執(zhí)行功能與多巴胺能通路相關(guān)，同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了基因多態(tài)性在多巴胺代謝通路中的重要作用。兒茶酚

4、氧位甲基轉(zhuǎn)移酶（Catechol-O-Methyltransferase，COMT）、單胺氧化酶B（monoamine oxidase B, MAO-B）、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（dopamine transporter, DAT）及芳香胺酸酶（Aromatic L-Amino Acid Decarboxylase, AADC）均是多巴胺合成代謝過程中重要的代謝酶，而編碼這四個(gè)代謝酶的基因多態(tài)性可能與PD執(zhí)行功能相關(guān)。
　　COMT基因第4

5、外顯子rs4680可發(fā)生纈氨酸（Val）與蛋氨酸（Met）的置換。有研究發(fā)現(xiàn)，Met純合子可提高前額葉（Prefrontal Cortex, PFC） DA水平，并與改善執(zhí)行功能與工作記憶相關(guān)。MAO-B基因位于X染色體，在該基因的內(nèi)含子13中存在由腺嘌呤（A）突變成鳥甘酸（G）的單堿基多態(tài)性，在一項(xiàng)對(duì)236例PD及369例對(duì)照的日本人群的研究中發(fā)現(xiàn)，MAO-B基因rs1799836位點(diǎn)的AA基因型與PD患病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。編碼DAT的基因S

6、LC6A3第9外顯子rs6347的GG純合子在早發(fā)性PD明顯減少。DDC基因rs921451在PD病人中行急性美多芭試驗(yàn)前后運(yùn)動(dòng)功能改善有差異性。目前尚未有關(guān)于MAO-B rs1799836、SLC6A3 rs6347及DDC rs921451與PD執(zhí)行功能相關(guān)性的研究。
　　由于目前對(duì)PD執(zhí)行功能障礙與DA能通路遺傳基因的研究鮮少，本課題擬在這方面開展研究，對(duì)多巴胺能通路中的 COMT rs4680、MAO-B rs179983

7、6、SLC6A3 rs6347及DDC rs921451進(jìn)行基因檢測(cè)，試圖尋找其與PD執(zhí)行功能障礙之間的相關(guān)性，以期為早期發(fā)現(xiàn)PD執(zhí)行功能障礙和早期治療提供新途徑和新靶點(diǎn)。
　　目的：對(duì)中國(guó)漢族PD伴執(zhí)行功能障礙患者進(jìn)行多巴胺能通路基因COMT、SLC6A3、MAO-B及DDC的多態(tài)性分析，探討多巴胺能通路基因多態(tài)性與PD執(zhí)行功能障礙的相關(guān)性。
　　材料和方法：以139例PD患者和139例正常對(duì)照者為研究對(duì)象。對(duì)PD組進(jìn)行認(rèn)

8、知功能評(píng)估，按照韋氏智力、韋氏記憶、畫鐘測(cè)驗(yàn)、語言流暢性的評(píng)估量表得分將PD組分為輕度認(rèn)知障礙（ mild cognitive impairment, PD-MCI）組與認(rèn)知正常（cognitive normal, PD-CN）組，PD-MCI組再進(jìn)一步分為PD伴執(zhí)行功能障礙、伴或不伴其他認(rèn)知領(lǐng)域障礙（executive function impairment,PD-EFI）組，及 PD不伴執(zhí)行功能障礙(executive funtio

9、n normal,PD-EFN）組。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測(cè)反應(yīng)(polymerase chain reaction-ligase detection reaction，PCR-LDR）測(cè)序分型技術(shù)對(duì)所有PD組和對(duì)照人群COMT基因rs4680位點(diǎn)，MAO-B基因rs1799836位點(diǎn)，SLC6A3基因rs6347位點(diǎn)及DDC基因rs921451位點(diǎn)進(jìn)行基因型分析。比較各組基因型和等位基因的總體分布頻率。率的比較用χ2檢驗(yàn)，鑒于本研

10、究中對(duì)同一數(shù)據(jù)集進(jìn)行了多個(gè)獨(dú)立假設(shè)檢驗(yàn)，我們采用了Bonferroni法對(duì)P值進(jìn)行較正。由于本研究中進(jìn)行了3個(gè)獨(dú)立假設(shè)檢驗(yàn)，即檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)P值需除以獨(dú)立假設(shè)檢驗(yàn)次數(shù)，即P<0.05/3(3為獨(dú)立假設(shè)檢驗(yàn)數(shù))才是本研究的最終檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)值。
　　結(jié)果：經(jīng)檢驗(yàn)， PD組和對(duì)照組每個(gè)位點(diǎn)基因型的分布均符合Hardy-Weinberg平衡。
　　各組間比較：
　　1. PD組與對(duì)照組間比較：
　?。?）PD組和對(duì)照組rs4680

11、位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3，3為獨(dú)立假設(shè)檢驗(yàn)數(shù)）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　?。?）PD組和對(duì)照組rs1799836位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組女性患者之間的A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)

12、意義（P>0.05/3）；兩組男性患者之間的A、G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　?。?） PD組和對(duì)照組rs6347位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/

13、3），提示rs6347位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　?。?） PD組和對(duì)照組rs921451位點(diǎn)C/C、C/T、T/T基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間C、T等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs921451位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　　2.將PD組進(jìn)一步分為PD-MCI及PD-CN組，兩組間進(jìn)行比較：
　　（1） PD-MCI組和PD-

14、CN組rs4680位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　?。?） PD-MCI組和PD-CN組rs1799836位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組女性患者之間的A/A、A/G、G/G基因型總體分

15、布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組男性患者之間的A、G基因型總體分布頻率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　　（3） PD-MCI組和PD-CN組rs6347位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布

16、的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs6347位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　?。?） PD-MCI組和PD-CN組rs921451位點(diǎn)C/C、C/T、T/T基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間C、T等位基因總體分布頻率的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)值P<0.05，但采用Bonferroni校正后P>0.05/3，提示C、T等位基因總體分布的頻率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，rs921451位點(diǎn)多態(tài)性可能

17、與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　　3.對(duì)PD-MCI組進(jìn)一步分為PD-EFI及PD-EFN組，與PD-CN組三組間進(jìn)行比較：
　?。?）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs4680位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　?。?）

18、PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs1799836位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組女性患者之間的 A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組男性患者之間的A、G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點(diǎn)多態(tài)性

19、可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　?。?）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs6347位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs6347位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　　（4）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs921451位點(diǎn)C/C、C/T、T/T基因型總體分

20、布的頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間C、T等位基因總體分布的頻率檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)值 P<0.05，但采用Bonferroni校正后P>0.05/3，提示C、T等位基因總體分布的頻率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示rs921451位點(diǎn)多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　　結(jié)論：1. COMT基因rs4680位點(diǎn)、MAO-B基因rs1799836位點(diǎn)、SLC6A3基因rs6347位點(diǎn)及DDC基因rs921451位點(diǎn)多態(tài)性與中國(guó)漢族