主客體結(jié)構(gòu)微球載體的設(shè)計、制備及其表面結(jié)構(gòu)對免疫檢測性能影響研究.pdf

1、開發(fā)高通量、高靈敏度和高特異性的免疫檢測方法是生物檢測和臨床診斷的迫切需求，基于主客體結(jié)構(gòu)的微球（beads on beads，BOBs）因其具有獨特的多元微納結(jié)構(gòu)與提高的可反應(yīng)比表面積而成為一類非常有應(yīng)用價值的新型載體材料。探究這類載體微球表面精細(xì)微觀結(jié)構(gòu)對固載其表面的生物分子活性影響的規(guī)律和作用機制對開發(fā)高性能生物載體非常重要。
　　本研究首先設(shè)計并可控制備了具有精密表面結(jié)構(gòu)的三類載體微球，一種是表面光滑的羧基光滑微球（MPC

2、），另外兩種為主客體結(jié)構(gòu)，但表面功能基團分布狀態(tài)不同的BOBs微球。其次，以上述三類微球為載體，采用酶聯(lián)免疫檢測方法（ELISA）探究固載在上述三類微球表面的抗體識別免疫復(fù)合物的能力，從而揭示BOBs載體微球的表面精細(xì)結(jié)構(gòu)對固載其表面的蛋白的生物活性的影響規(guī)律與作用機制?；诖四康?，本文首先分別利用羧基氧化硅納米顆粒和氨基磁性聚苯乙烯微球（MPs）為客體子球與主體母球，通過EDC/NHS活化法制備得到了表面具有類樹梅形貌、具有微納精細(xì)結(jié)

3、構(gòu)且主體微球表面功能基團為氨基的BOBs微球（SCMPN），并在SCMPN基礎(chǔ)上通過表面羧基修飾制備得到了主、客體微球表面功能基團均為羧基的BOBs微球（SCMPC）。然后，分別研究了三種微球的基本理化性能，并以抗hCG抗體為模式研究對象，將抗α-hCG抗體共價荷載在上述三類微球表面，采用ELISA檢測與流式熒光免疫檢測兩種典型的分析系統(tǒng)，分別研究他們在PBS緩沖體系和血清體系中識別免疫復(fù)合物的能力。結(jié)果表明抗體分子結(jié)合于SCPMN表面