超聲可視DOX-PLGA-Fe原位植入物磁熱-化療協(xié)同治療腫瘤.pdf

1、第一部分材料的制備及體外磁熱性能的研究
　　目的：制備可注射液固相變型磁熱療聯(lián)合化療材料（DOX/PLGA-Fe），并研究其在外加交變磁場中的磁熱性能。
　　方法：制備Fe質(zhì)量分數(shù)分別為1％、10%和20%的DOX/PLGA-Fe，其中DOX的含量為1%，將它們暴露于外加交變磁場時，運用熱紅外成像儀記錄溫度的變化，得到時間溫度曲線，以此篩選出最優(yōu)Fe質(zhì)量分數(shù)的DOX/PLGA-Fe。將50μl最優(yōu)Fe質(zhì)量分數(shù)的DOX/PLG

2、A-Fe注入離體牛肝中，并施以外加交變磁場（頻率：626 KHz，電流：28.6 A，線圈直徑：3 cm），分別測量加熱2 min、3 min和5 min時組織凝固壞死的體積，并超聲下觀察組織塊回聲的變化，以此篩選出最適消融時間。
　　結(jié)果：DOX/PLGA-Fe在外加交變磁場中具有良好的升溫性能，通過權(quán)衡各項指標（如上升的溫度，加熱時間以及材料的配比等），最終選擇Fe質(zhì)量分數(shù)為20%的DOX/PLGA-Fe為最優(yōu)，其能夠在有效時

3、間內(nèi)升溫達到使組織產(chǎn)生凝固性壞死的溫度。50μl Fe質(zhì)量分數(shù)為20%的DOX/PLGA-Fe注入離體牛肝后置于外加交變磁場中作用時間越長，組織凝固性壞死的體積越大，為后續(xù)體內(nèi)治療試驗提供的時間參考。
　　結(jié)論：DOX/PLGA-Fe能在外加交變磁場中產(chǎn)熱，可控性強，其最高溫度能使組織達到凝固性壞死，為后續(xù)試驗篩選出最適實驗條件。
　　第二部分DOX/PLGA-Fe體外藥物釋放的實驗研究
　　目的：制備可注射液固相變型

4、磁熱療聯(lián)合化療材料（DOX/PLGA-Fe），并研究其在外加交變磁場中藥物釋放的特性。
　　方法：參照第一部分實驗結(jié)果，本部分選用50μl含有Fe質(zhì)量分數(shù)為20%的DOX/PLGA-Fe，置于pH值分別為5.0、7.4的PBS中并放入搖床中震蕩24 h，每30 min取1 ml釋放液，隨后補充1 ml相同pH值的PBS，實驗組分別在時間點為0.5 h、2 h、6 h及21 h時施加10 s外加交變磁場。所有取出的釋放液均用紫外分光

5、光度計測量吸收峰以計算DOX釋放量。對照組不施加交變磁場，重復上述步驟。另將50μl含有20%的DOX/PLGA-Fe超聲引導下注入體積為2 cm×2 cm×2 cm的離體牛肝中，分別磁加熱2 min、3 min和5 min，隨后取離消融中心1 cm處組織進行快速冰凍切片，并于倒置熒光顯微鏡下觀察其熒光信號的強弱，以此來衡量DOX的釋放量。
　　結(jié)果：pH5.0及7.4磁加熱組DOX在24h累計釋放量分別達到了82%和63%，明顯

6、高于對照組（45%和43%），說明可以利用外加交變磁場促進 DOX/PLGA-Fe中的藥物釋放。離體牛肝實驗也表明，隨著磁加熱時間的延長，DOX釋放的范圍越廣，并且超出凝固性壞死的區(qū)域。
　　結(jié)論 DOX/PLGA-Fe可以實現(xiàn)外加交變磁場控制藥物釋放，且藥物可超出凝固性壞死區(qū)域，具有殺死殘余腫瘤的潛力，為后續(xù)體內(nèi)腫瘤治療提供理論依據(jù)。
　　第三部分超聲可視DOX/PLGA-Fe原位植入物磁熱/化療協(xié)同治療腫瘤
　　目

7、的：制備可注射液固相變型磁熱療聯(lián)合化療材料（DOX/PLGA-Fe），并研究其在外加交變磁場中對腫瘤原位磁熱療與化療的效果。
　　方法：參照前兩部分的結(jié)果，采用篩選出的最適實驗條件，選用50μl含有20%的DOX/PLGA-Fe超聲引導下注入腫瘤內(nèi)進行磁熱療110 s聯(lián)合化療的實驗研究。將20只荷皮下移植瘤的裸鼠隨機分為4組，分別為空白對照組（A,Control）、單純化療組（B,DOX/PLGA）、單純磁熱療組（C,PLGA-2

8、0%Fe+AMF）、磁熱療聯(lián)合化療組（D,DOX/PLGA-20%Fe+AMF），外加交變磁場持續(xù)加熱110 s，用遠紅外熱成像儀記錄裸鼠溫度的變化。治療1天后，每組隨機處死3只裸鼠，剝離腫瘤固定于3%多聚甲醛進行HE、PCNA及TUNEL染色，并計算增殖指數(shù)及凋亡指數(shù)。剩余的裸鼠每日記錄其腫瘤生長變化情況。
　　結(jié)果：磁熱療聯(lián)合化療組腫瘤完全治愈，凋亡指數(shù)最高，且增殖指數(shù)最低；而單純化療組及單純磁熱療組殘余癌繼續(xù)生長；未經(jīng)任何治