妊娠期肝內(nèi)膽汁瘀積癥胎盤SIRT1異常表達(dá)及其意義研究.pdf

1、目的：檢測(cè)炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)因子NF-κB及去乙?；窼IRT1在正常胎盤組織及ICP胎盤組織的蛋白表達(dá)情況；探討牛磺膽酸(Taurocholic acid，TCA)誘導(dǎo)胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞系HTR-8細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，及白藜蘆醇對(duì)HTR-8細(xì)胞炎癥反應(yīng)的抑制作用及機(jī)制。
　　方法：收集臨床胎盤標(biāo)本及肝功能指標(biāo)（正常、ICP輕度和ICP重度），免疫組化及免疫印跡法檢測(cè)SIRT1以及NF-κB的定位以及蛋白表達(dá)情況。不同濃度TCA處理HTR-8

2、細(xì)胞24小時(shí)（組11：TCA=0μmol/L,組2：TCA=2μmol/L,組3：TCA=20μmol/L,組4：TCA=100μmol/L），免疫熒光及免疫印跡法檢測(cè) SIRT1定位，SIRT1、NF-κB和TNF-α蛋白表達(dá)情況。SIRT1激動(dòng)劑白藜蘆醇（resveratrol，Res）處理各組細(xì)胞24小時(shí)，SIRT1抑制劑Ex-527與白藜蘆醇同時(shí)處理各組細(xì)胞24小時(shí)，免疫印跡法檢測(cè)處理后SIRT1、NF-κB及TNF-α蛋白表達(dá)

3、的變化情況。
　　結(jié)果：SIRT1與NF-κB主要表達(dá)于胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。SIRT1蛋白在ICP胎盤組織的表達(dá)低于正常胎盤組織，NF-κB蛋白在ICP胎盤組織的表達(dá)高于正常胎盤組織；SIRT1蛋白在組3和組4中的表達(dá)低于組1和組2中的表達(dá)，NF-κB及TNF-α蛋白在組3和組4中的表達(dá)高于組1和組2中的表達(dá)。差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。使用白藜蘆醇處理組3和組4后，SIRT1蛋白表達(dá)升高，NF-κB及TN