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文檔簡介
1、目的:通過觀察不同濃度的三硝基苯磺酸(TNBS)誘導的大鼠克羅恩病模型,確定最佳造模濃度及造模條件。觀察潰結(jié)康不同劑量及不同給藥途徑對TNBS誘導的克羅恩病模型的治療作用。通過觀察記錄大鼠進食、毛色、活動情況和體重增長情況,大便性狀,結(jié)腸大體標本,腸粘膜損傷與修復等情況,以明確潰結(jié)康對克羅恩病的作用,為該藥物應用于克羅恩病治療提供試驗依據(jù)。
方法:
1. TNBS誘導的克羅恩病大鼠模型建立。通過給予不同濃度的TNBS
2、誘導的克羅恩病大鼠模型以確定最佳造模濃度。將14只大鼠隨機分為TNBS低劑量造模組4只、TNBS中劑量造模組4只、TNBS高劑量造模組4只和正常組2只,雌雄各半。通過觀察大鼠飲食、體重、毛色和精神狀態(tài)等一般臨床情況,觀察糞便情況(便潛血、血便、腹瀉)。2周后處死取結(jié)腸組織,觀察大鼠結(jié)腸組織損傷情況,證實克羅恩病形成。
2.分組:將72只大鼠隨機分為12組,每組6只,雌雄各半。分別為灌胃組:包括灌胃正常組、灌胃模型組、灌胃陽性對
3、照藥物(美沙拉嗪)組、灌胃受試藥物高、中、低劑量組;灌腸組:包括灌腸正常組、灌腸模型組、灌腸陽性對照藥物(美沙拉嗪)組、灌腸受試藥物高、中、低劑量組。
3.藥物治療:大鼠造模前24小時禁食不禁水,造模24小時后開始給予不同濃度受試藥物或相同體積的0.9%氯化鈉注射液進行干預。每天1次,連續(xù)21天,末次給藥后繼續(xù)觀察24小時。
4.療效評價:每天觀察大鼠的體重、飲食、毛色和精神狀態(tài)等一般癥狀,觀察是否出現(xiàn)腹瀉、便潛血陽
4、性,并對疾病活動指數(shù)(DAI)進行評分。試驗結(jié)束后記錄潰結(jié)康灌腸給藥或灌胃給藥對大鼠血清干擾素-γ(IFN-γ)、腸粘膜中谷氨酰胺(Gln)、白介素-l(IL-1)、白介素-4(IL-4)和白介素-10(IL-10)的含量的影響,并觀察藥物對大鼠結(jié)腸組織損傷評分以及病理學的影響,與正常組、模型組和陽性對照藥物(美沙拉嗪)組進行比較。
結(jié)果:
1. TNBS誘導的克羅恩病模型可引起大鼠體重下降,肉眼血便或便潛血陽性,
5、DAI評分增高,觀察結(jié)腸大體標本形態(tài),腸粘膜損傷等情況,證實TNBS灌腸造??梢哉T導克羅恩病形成。以100mg/kg(3mL/kg)低劑量造模后,4天后癥狀趨向好轉(zhuǎn),于6~8天后大便已基本成型,肉眼觀察未見粘液和血便。至2周末解剖時,其中一只大鼠結(jié)腸已逐漸自我痊愈。以125mg/kg(3.75mL/kg)中劑量造模后,大鼠無死亡例數(shù),且2周后無自愈情況出現(xiàn)。以150mg/kg(4.5mL/kg)高劑量造模后,大鼠死亡率較高。故而選擇12
6、5mg/kg為TNBS誘導的克羅恩病模型的造模濃度。
2.潰結(jié)康不同劑量組灌腸或灌胃給藥均可改善 TNBS誘導的大鼠克羅恩病引起的DAI評分增高以及降低血清IFN-γ,IL-1水平,升高腸粘膜Gln,緩解克羅恩病組織學變化,其中尤以潰結(jié)康高劑量灌腸給藥作用更為明顯。
3.潰結(jié)康灌腸給藥作用更為明顯,優(yōu)于灌胃給藥方式。
結(jié)論:本研究通過觀察不同濃度的 TNBS誘導的克羅恩病大鼠模型,證實 TNBS灌腸造??梢?/p>
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