脂肝方對(duì)非酒精性脂肪肝NF-κB-TNF-α-Bcl-2通路的調(diào)節(jié)效應(yīng).pdf

1、目的：本課題針對(duì)“NF-κB-T NF-α”/Bc l-2信號(hào)通路在非酒精性脂肪肝病發(fā)病中的作用，通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究觀(guān)察脂肝方對(duì)非酒精性脂肪肝病大鼠肝細(xì)胞炎癥、凋亡，及其相關(guān)的NF-κB、TNF-α、bc l-2蛋白的表達(dá)影響，旨在探討脂肝方對(duì)非酒精性脂肪肝病“NF-κB-TNF-α”/Bc l-2信號(hào)通路介導(dǎo)的肝細(xì)胞炎癥與凋亡的干預(yù)效應(yīng)。
　　方法：SD大鼠80只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分出10只作為8周空白組（第8周末處死）和10

2、只12w空白組為正常對(duì)照組，始終喂養(yǎng)普通飼料。其余60只高脂飼料喂養(yǎng)至8周后，隨機(jī)分出8周模型組10只（第8周末處死）、其余50只繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)，隨機(jī)分為12周模型組、脂肝方低劑量組、脂肝方中劑量組、脂肝方高劑量組及西藥組各10只，五組喂養(yǎng)高脂飼料至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。第8周至第12周之間進(jìn)行藥物干預(yù)，中藥組大鼠給予脂肝方高、中、低劑量灌胃，西藥組大鼠予立普妥灌胃，連續(xù)4周。各組動(dòng)物喂養(yǎng)至12周末處死取材。禁食12小時(shí)后取血，采集肝臟，采用全自

3、動(dòng)生物化學(xué)儀檢測(cè)血清ALT、AS T、TG、TC的水平；HE染色觀(guān)察各組肝組織病理學(xué)改變；WesternBlot檢測(cè)NF-κB、TNF-α及bcl-2蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，模型組血清ALT、AS T、TG、TC較同期空白組顯著升高（P＜0.01），12周模型組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死程度及肝細(xì)胞脂肪變性程度，明顯比8周模型組嚴(yán)重（P＜0.05）。與模型組相比，病理學(xué)顯示治療組的脂肪性炎性及脂質(zhì)沉積有明顯減輕和好轉(zhuǎn)，使實(shí)

4、驗(yàn)大鼠肝組織病理學(xué)改變減輕并且趨于正常，治療組血清TC、TG的含量明顯降低，肝功能ALT和AST明顯下降。治療組降低大鼠血清ALT、AST、TG、TC的作用，其中脂肝方高劑量組療效最為顯著。Western Blot結(jié)果顯示，模型組NF-κB蛋白表達(dá)水平較同期空白組明顯升高，而bcl-2蛋白表達(dá)則比同期空白組顯著降低（P＜0.05）。與同期模型組比較，治療組大鼠的肝組織NF-κB蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.01），bcl-2蛋白表達(dá)明顯上升

5、（P＜0.01），脂肝方高劑量組明顯優(yōu)于其他各治療組。與空白組相比，同期模型組肝臟組織TNF-α表達(dá)顯著上升（P<0.01），藥物干預(yù)后各組TNF-?表達(dá)均不同程度降低，高劑量組明顯優(yōu)于其它治療組（P＜0.01）。
　　結(jié)論：脂肝方具有肝臟保護(hù)作用，明顯改善非酒精性脂肪性肝病模型大鼠的肝臟脂肪變性、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和抑制細(xì)胞脂滴聚集。脂肝方通過(guò)降低NF-κB和TNF-α的表達(dá)水平來(lái)減輕炎癥反應(yīng)，通過(guò)上調(diào)抗凋亡因子bcl-2蛋白表達(dá)水平