雙靶點(diǎn)抑制EGFR與IGF-1R治療腎上腺皮質(zhì)癌分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：腎上腺皮質(zhì)癌（ACC）發(fā)病率低且惡性程度高，預(yù)后差，臨床治療方法有限；本課題旨在研究聯(lián)合靶向抑制EGFR與IGF1R應(yīng)用于ACC治療，并闡明其聯(lián)合應(yīng)用治療的分子機(jī)制。
　　方法：選取在瑞金醫(yī)院診治的37例腎上腺皮質(zhì)腫瘤標(biāo)本（其中20例 ACC，17例ACA），并經(jīng)免疫組化方法檢測標(biāo)本中EGFR、IGF1R、p-ERK和p-mTOR蛋白表達(dá)水平；通過MTT實(shí)驗(yàn)及Annexin-V/PI雙染法檢測靶向抑制劑聯(lián)用對ACC細(xì)胞系SW

2、13和H295R增殖及凋亡的影響，并進(jìn)一步采用蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞下游信號通路蛋白的表達(dá)水平；采用ACC移植瘤模型觀察聯(lián)合靶向治療對移植瘤的影響。
　　結(jié)果：ACC中EGFR（75.0％）、IGF1R（70.0%）、p-ERK（60.0%）和p-mTOR（70.0%）均呈高表達(dá)，且較ACA組陽性率高（P<0.05）；其中12/20例ACC患者EGFR及 IGF1R皆表達(dá)陽性，ACA組發(fā)生率為11.76%（2/17），組間差異具有統(tǒng)

3、計學(xué)意義（P<0.01）。EGFR抑制劑Erlotinib及IGF1R抑制劑NVP-AEW541單獨(dú)應(yīng)用呈濃度-時間相關(guān)抑制 SW13和 H295R細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡，Erlotinib和NVP-AEW541分別通過下調(diào)MEK/ERK和Akt信號通路發(fā)揮腫瘤抑制的作用。SW13細(xì)胞單獨(dú)應(yīng)用NVP-AEW541會代償性上調(diào)MEK/ERK通路以維持mTOR信號通路水平，mTOR是EGFR及IGF1R下游通路的信號交聯(lián)點(diǎn)。聯(lián)合應(yīng)用則可以協(xié)同抑

4、制SW13細(xì)胞（CI:0.58±0.23）和H295R細(xì)胞（CI:0.20±0.05）增殖并誘導(dǎo)ACC細(xì)胞凋亡，其通過雙向下調(diào)MEK/ERK及Akt/mTOR信號通路實(shí)現(xiàn)協(xié)同抑制腫瘤的作用，移植瘤實(shí)驗(yàn)從動物體內(nèi)水平進(jìn)一步驗(yàn)證了聯(lián)合治療可以協(xié)同抑制腫瘤。
　　結(jié)論：結(jié)果提示EGFR和IGF1R及其下游信號通路參與了ACC腫瘤的發(fā)生及發(fā)展；研究還發(fā)現(xiàn)ACC中EGFR及IGF1R之間存在信號交聯(lián)，mTOR作為兩者下游信號通路的匯合點(diǎn)，聯(lián)