桑樹轉景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因(MSBPase)的研究.pdf

1、山東農業(yè)大學碩士學位論文桑樹轉景天庚酮糖-1，7-二磷酸酶基因（MSBPase）的研究姓名：王海朋申請學位級別：碩士專業(yè)：特種經濟動物飼養(yǎng)指導教師：王洪利2011-06-10桑樹轉景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因（MSBPase）的研究 23 以新桑 11 號組培苗為材料，通過單因子試驗，確定了遺傳轉化的最佳侵染濃度、侵染時間、共培養(yǎng)時間、kan 篩選濃度、cef 抑菌濃度組合，建立了桑樹葉盤遺傳轉化體系。試驗表明：菌液侵染濃度以 OD

2、600= 0.3 最佳；感染桑樹葉盤以 10 min 為宜；共培養(yǎng) 2 d 最有利于轉化；以 20 mg/L 的 Kan 進行初篩，30 mg/L 的 Kan 進行二次篩選，并用 400 mg/L 的Cef 抑菌，既可以獲得較高的再生芽轉化頻率，又能得到較好抑菌效果。此轉化體系轉化效率為 10%。 4 對轉化抗性桑芽進行 PCR 擴增，電泳圖譜表明 MSBPase 基因已經被導入到桑樹組織中，桑樹轉 MSBPase 基因獲得初步成功。