微囊藻毒素LR致大鼠肝細(xì)胞氧化應(yīng)激對修復(fù)基因的影響.pdf

1、目的：
　　 體外培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞BRL，測定微囊藻毒素LR對細(xì)胞增殖、凋亡、氧化損傷的影響以及修復(fù)基因JWA、XRCC1、PARP1的變化，探討微囊藻毒素LR致大鼠肝細(xì)胞BRL氧化損傷對修復(fù)基因JWA、XRCC1、PARP1的影響。
　　 方法：
　　 1.分別以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細(xì)胞BRL24h、48h和72h，用MTT法檢測細(xì)胞增殖與凋亡情況。
　　 2.分別以0、1

2、、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細(xì)胞BRL48h，測定細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物岐化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)的含量及乳酸脫氫酶(LDH)的漏出率。
　　 3.分別以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細(xì)胞BRL24h、48h和72h，應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)測定JWA、XRCC1和PARP1基因mRNA的表達(dá)量變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.與不加

3、毒素的對照組細(xì)胞相比，各染毒組(1、5、10、30μg/ml)MC-LR抑制BRL細(xì)胞生長，MC-LR染毒劑量越高，細(xì)胞吸光度值越低；并隨著MC-LR染毒時問延長，細(xì)胞吸光度值逐漸降低，呈劑量效應(yīng)關(guān)系和時間效應(yīng)關(guān)系。
　　 2.與不加毒素的對照組細(xì)胞相比，1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒BRL細(xì)胞48h，細(xì)胞內(nèi)MDA含量有增加的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)差異；30μg/ml染毒組T-SOD、GSH-PX含量下降，10、30μg/

4、ml染毒組LDH漏出率增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.與不加毒素的對照組細(xì)胞相比，30μg/ml MC-LR染毒48小時BRL細(xì)胞PARP1基因表達(dá)下降，染毒72小時BRL細(xì)胞JWA、XRCC1和PARP1基因均表達(dá)下降。
　　 結(jié)論：
　　 1.1-30μg/ml MC-LR可以抑制大鼠肝細(xì)胞BRL的增殖，呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系和時間效應(yīng)關(guān)系。
　　 2.MC-LR可引起B(yǎng)RL細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，10、30