氧化應(yīng)激對(duì)仔豬肝細(xì)胞中AMPK活性的影響.pdf

1、為初步探索氧化應(yīng)激對(duì)AMPK活性的影響，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)建立仔豬氧化應(yīng)激模型，研究了不同氧化劑引起氧化應(yīng)激、以及Vc抑制氧化應(yīng)激后AMPK活性的變化情況?！　?shí)驗(yàn)共分為6個(gè)處理：處理一，對(duì)照組，采用低糖型的DMEM為基礎(chǔ)培養(yǎng)液分離培養(yǎng)仔豬肝細(xì)胞；處理二，在處理一培養(yǎng)液中加入0.6mmol/L的H2O2；處理三，在處理一培養(yǎng)液中加入1mmol/L的百草枯(PQ)；處理四，0.2mmol/L的Vc預(yù)處理30min后再加入0.6m

2、mol/L的H2O2；處理五，0.2mmol/L的Vc預(yù)處理30min后再加入1mmol/L的百草枯；處理六，只加入0.2mmol/L的Vc。以原代分離培養(yǎng)的仔豬肝細(xì)胞為材料，測(cè)定了細(xì)胞中AMPK活性，細(xì)胞培養(yǎng)液中總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)濃度，并通過(guò)對(duì)培養(yǎng)液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)，以及細(xì)胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽還原酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)濃度的測(cè)定來(lái)反映細(xì)胞氧

3、化應(yīng)激情況。結(jié)果表明：　　在采用Vc預(yù)處理后，可以使細(xì)胞內(nèi)ALT和LDH的外流保持不變或減少，抗氧化酶活性的下降受到一定程度的抑制，NO和MDA產(chǎn)生處于正常水平。說(shuō)明Vc可以減輕由H2O2和PQ造成的氧化損傷。各處理AMPK活性的變化情況是H2O2和PQ處理組比對(duì)照組分別提高55.¨％和45.97％(P＜0.05)。Vc預(yù)處理后再加入H2O2比H2O2組AMPK活性降低21.94％，Vc預(yù)處理后再加入PQ處理組比PQ組AMPK活性降低