逍生散治療干眼的臨床研究及實驗研究.pdf

1、干眼是眼科門診相當(dāng)常見的疾病之一，其臨床表現(xiàn)主要是眼部干燥、異物感、畏光及眼皮沉重緊繃等不適，嚴(yán)重者可引起視功能下降，從而影響工作和生活。
　　祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為“肝開竅于目”，“肝在液為淚”，肝所受藏的精微物質(zhì)輸送于目，使目受滋養(yǎng)，從而維持正常的視覺功能。逍生散是導(dǎo)師謝立科主任醫(yī)師臨床經(jīng)驗的總結(jié)，臨床常用于治療干眼患者證屬肝郁陰虛證者。使用疏肝養(yǎng)陰法辨證治療干眼，前期應(yīng)用于臨床及動物實驗均顯示一定療效，本研究旨在進(jìn)一步探討逍生散治療干

2、眼的作用及分子作用機(jī)制，為干眼的中醫(yī)治療提供新思路和客觀依據(jù)。
　　目的
　　觀察肝郁陰虛型干眼各證候要素的分布;比較三種不同檢查方法測量干眼淚膜穩(wěn)定性的差異及相關(guān)性;觀察逍生散對肝郁陰虛型干眼治療前后淚膜穩(wěn)定性、臨床癥狀評分、淚液分泌試驗SchimerⅠ及角膜熒光素染色積分的變化;觀察逍生散對干眼角膜上皮細(xì)胞損傷模型的干預(yù)作用，進(jìn)一步探討逍生散治療干眼的作用及分子作用機(jī)制。
　　方法
　　1參照干眼診斷標(biāo)準(zhǔn)和中

3、醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)選取我院門診干眼患者中證屬肝郁陰虛者100例，將各中醫(yī)證候條目分為無、輕度、中度、重度4級，分別計0、1、2、3分，問診時準(zhǔn)確記錄患者信息，根據(jù)積分法進(jìn)行統(tǒng)計分析，進(jìn)行肝郁陰虛型干眼的臨床調(diào)研。
　　2用Sirius、RT-7000及FLS三種方法測量干眼患者的淚膜穩(wěn)定性，分析比較三種方法對淚膜穩(wěn)定性測量的差異及相關(guān)性。
　　3選取我院門診干眼患者中證屬肝郁陰虛者80例，口服中藥逍生散治療連續(xù)4周，治療前和治療后，

4、觀察患者淚膜穩(wěn)定性、臨床癥狀評分、淚液分泌試驗SchimerⅠ及角膜熒光素染色積分的變化。
　　4人角膜上皮細(xì)胞加入苯扎氯銨溶液制備得干眼角膜上皮細(xì)胞損傷模型，加入低、中、高劑量逍生散含藥血清和空白對照血清孵育后，分別于作用24h、48h、72h時用光鏡觀察角膜上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，CCK-8法檢測細(xì)胞活性，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及RT-PCR檢測角膜上皮細(xì)胞中IL-1、IL-6、TNF-a、MMP-9細(xì)胞因子的表達(dá)情況。
　

5、　結(jié)果
　　1本研究所納入患者，平均年齡42.09歲，其中最小18歲，最大60歲;性別方面，男性44人(占44.00％)，女性56人（占56.00％）;職業(yè)方面，工人14人（占14.00％），退休9人（占9.00％），無業(yè)5人（占5.00％），學(xué)生4人（占4.00％），職員68人(占68.00％);證候要素（除舌脈）所占比例由大到小前三位依次為目珠干燥、刺痛、煩躁易怒。
　　2三種方法測量的淚膜破裂時間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜

6、0.05)，兩兩比較結(jié)果顯示FLS法測量的淚膜破裂時間與Sirius和RT7000相比相對較長，而Sirius和RT7000的淚膜破裂時間測量相對較短且他們之間沒有差異。Pearson相關(guān)分析結(jié)果表明，F(xiàn)LS和Sirius的相關(guān)系數(shù)為0.39，F(xiàn)LS和RT7000的相關(guān)系數(shù)為0.41，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3服用逍生散后三種測量方法的結(jié)果均顯示淚膜破裂時間變長，且時間增加具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0001)，相關(guān)性分

7、析結(jié)果顯示，同一種方法在服用中藥前后的測量結(jié)果一致性較高，Sirius法服藥前后的相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.81(P＜0.0001)，RT7000的相關(guān)系數(shù)為0.83(P＜0.0001)，F(xiàn)LS的測量結(jié)果前后一致性稍差，相關(guān)系數(shù)為0.68(P＜0.0001);用藥后臨床癥狀評分降低，淚液分泌量增加，角膜熒光素染色積分降低，均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0001)。
　　4苯扎氯胺濃度為1ug/ml時，對角膜上皮細(xì)胞毒性較低，可見細(xì)胞隨時間延長緩

8、慢變大，包漿內(nèi)空泡逐漸增加，細(xì)胞活性相對降低，其作用比較緩和，故選用1ug/ml的BAC濃度作為造模濃度?？瞻籽鍧舛炔桓哂?0％時，對角膜上皮細(xì)胞活性沒有影響，故選用10％的空白血清作為對照，2.5％、5％、10％的逍生散含藥血清作為中藥低、中、高劑量組進(jìn)行實驗。中藥中、高劑量組干預(yù)角膜上皮細(xì)胞損傷模型，能明顯抑制細(xì)胞體積增大、細(xì)胞松解及間隙變大，減少細(xì)胞脫壁及溶解、壞死;減少細(xì)胞凋亡;CCK-8法檢測細(xì)胞活性顯示，中藥中、高劑量的細(xì)

9、胞活性值和其他組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); R-T PCR檢測IL-1、IL-6、TNF-a及MMP-9的表達(dá)，結(jié)果顯示，中藥中、高劑量組的結(jié)果相對較低，且呈現(xiàn)隨藥物濃度增加，抑制效果相對越好的結(jié)果，24h、48h和72h時點均出現(xiàn)中藥中、高劑量組抑制炎癥因子的作用更為明顯(P＜0.05)。
　　結(jié)論
　　1、肝郁陰虛型干眼患者以女性居多，好發(fā)于40歲左右，常見從事職業(yè)為職員、工人、退休人員，主要證候有目珠干燥、刺痛

10、、煩躁易怒。
　　2、三種不同檢查方法測量干眼患者的淚膜破裂時間有不同，F(xiàn)LS法測量的時間相對較長，Sirius和RT7000測量的時間相對較短，但三種方法測量的淚膜破裂時間在趨勢上有一致性，對干眼的臨床診斷和治療均有一定意義。
　　3、逍生散治療肝郁陰虛型干眼患者后三種測量方法均顯示淚膜破裂時間變長，且同一種方法在服用中藥前后的測量結(jié)果一致性較高;用藥后臨床癥狀評分降低，淚液分泌量增加，角膜熒光素染色積分降低，進(jìn)一步證實了