球結(jié)膜微循環(huán)在兔系統(tǒng)性硬化肺動(dòng)脈高壓中的意義及VEGF的相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的：
　　肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)是一類病因復(fù)雜、預(yù)后較差的疾病。特別是結(jié)締組織?。╟onnective tissue disease，CTD）相關(guān)PAH，其起病隱匿，診斷不充分，在臨床診療中仍是難點(diǎn)。微循環(huán)障礙是系統(tǒng)性硬化（systemic sclerosis，SSc）發(fā)病機(jī)制中的中心環(huán)節(jié)，兩者間的相關(guān)性也越來越被認(rèn)可。由于臨床研究的眾多局限，動(dòng)物模型對(duì)疾病發(fā)病

2、機(jī)制及診療手段的探索提供了極大的幫助。本研究擬用博來霉素（ bleo myc in， BLM）聯(lián)合野百合堿（monocrotaline，MCT）誘導(dǎo)模擬SSc合并PAH發(fā)病機(jī)制的兔模型，探討球結(jié)膜微循環(huán)與PAH的聯(lián)系，及其在疾病中的早期預(yù)測(cè)價(jià)值。同時(shí)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）既往已被多個(gè)研究證實(shí)在微循環(huán)障礙、血管重塑中發(fā)揮重要作用。本文試圖在動(dòng)物模型中，對(duì) PAH

3、、球結(jié)膜微循環(huán)分析及 VEGF水平的相關(guān)性進(jìn)行討論，進(jìn)一步探索球結(jié)膜微循環(huán)在 SSc合并PAH中的意義。
　　方法：
　　1.選取新西蘭雄兔24只，隨機(jī)分為三組（溶劑對(duì)照組、模型組、激素組），每組8只。模型組及激素組分別一次性腹腔注射1％的MCT50 mg/k g及每日腹部皮下注射 BLM100ul（濃度1mg/ml），激素組同時(shí)每日腹腔注射甲潑尼龍（methylprednisolone，MP）2.6mg/kg（濃度1mg/

4、ml），三周后停止給藥。隨后，利用右心導(dǎo)管測(cè)量平均肺動(dòng)脈壓（mean pulmonary arterial pressure，mPAP），與溶劑對(duì)照組對(duì)比，判斷造模是否成功。并通過測(cè)量右心室肥大指數(shù)（ right ventricular hypertrophy index，RVHI）及完善組織病理，進(jìn)一步評(píng)估模型是否符合SSc合并PAH病理特點(diǎn)。
　　2.給藥前后進(jìn)行球結(jié)膜微循環(huán)分析，利用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清 VE

5、 GF表達(dá)。分析球結(jié)膜微循環(huán)積分、VE GF濃度及 mPAP的相關(guān)性，并利用ROC曲線判斷球結(jié)膜微循環(huán)積分對(duì)SSc合并PAH的診斷價(jià)值。
　　結(jié)果：
　　1.模型組mPAP及RVHI均顯著高于溶劑對(duì)照組和激素組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.組織病理：皮膚染色顯示，模型組皮損處表皮萎縮并角化過度，真皮層出現(xiàn)少量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)；肺組織染色顯示，模型組肺泡內(nèi)可見大量出血，細(xì)小動(dòng)脈肌化并不規(guī)則增厚，形成叢樣結(jié)

6、構(gòu)，伴有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　3.結(jié)膜微循環(huán)分析顯示，模型組總積分較其他兩組有明顯差異（P＜0.05），主要表現(xiàn)在血管增粗、血管扭曲、網(wǎng)狀畸形、出血、血管色調(diào)等方面，以上項(xiàng)目均與mPAP成正相關(guān)（P＜0.05）。
　　4.球結(jié)膜微循環(huán)總積分ROC曲線分析，曲線下面積為0.852（P＜0.05）?？偡?.2分對(duì)應(yīng)的正確診斷指數(shù)最大，把球結(jié)膜微循環(huán)總積分≥5.2分作為輔助診斷PAH的分界點(diǎn)，其敏感度為88.9%，特異度為7

7、5.0%。
　　5.模型組血清VEGF濃度較其他兩組有顯著差異（P＜0.05），并與球結(jié)膜微循環(huán)總積分及mPAP成正相關(guān)（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.新西蘭雄兔利用BLM聯(lián)合MCT注射可以成功模擬SSc合并PAH模型。
　　2. SSc合并PAH存在球結(jié)膜微循環(huán)障礙，其嚴(yán)重程度與mPAP成正相關(guān)，特別是在血管增粗、血管扭曲、出血、網(wǎng)狀畸形、血管色調(diào)等方面。
　　3.球結(jié)膜微循環(huán)總積分≥5.2分可以