肝臟中FKBP38的缺失對肝臟功能的影響.pdf

1、目的:通過分析研究FKBP38(FK506 Binding Protein38)基因肝臟特異敲除小鼠模型，探討FKBP38對肝臟功能的影響。
　　方法:
　　1.利用胚胎注射法構(gòu)建攜帶loxP位點(diǎn)的FKBP38轉(zhuǎn)基因小鼠。將此小鼠與攜帶肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞特異性表達(dá)的Alb-Cre小鼠交配，獲得FKBP38基因肝臟特異敲除小鼠模型Alb-Cre:FKBP38fl/fl。同時(shí)利用PCR，RT-qPCR和Western Blot的方法對

2、FKBP38肝臟特異性敲除鼠進(jìn)行鑒定。
　　2.采用Western Blot，TUNEL，ELISA，檢測空腹血糖的方法分析FKBP8缺失對肝臟功能的影響。
　　3.對小鼠肝臟組織進(jìn)行組織病理學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中FKBP38基因的mRNA，蛋白表達(dá)水平相對于同年齡同窩野生型小鼠具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.001)。
　　2.FKBP38肝臟特異敲除小

3、鼠FKBP38-/-肝臟中，轉(zhuǎn)錄和翻譯相關(guān)蛋白水平相較于對照組小鼠，p70 S6K的磷酸化水平上調(diào)，4EBP-1的磷酸化水平則被下調(diào)。
　　3.與對照組相比較，F(xiàn)KBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-的體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，空腹血糖水平在5月齡和10月齡顯著降低。
　　4.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中，凋亡相關(guān)蛋白BCL-2與對照組比較，未見差異化表達(dá)，細(xì)胞凋亡也未見顯著差異。
　　5.FKB

4、P38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中，小鼠肝功能指標(biāo)谷草轉(zhuǎn)氨酶AST和谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT水平相較于對照組未見顯著差異。
　　6.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟病理學(xué)分析，未見組織顯著增生性病變，單位面積細(xì)胞核數(shù)量則比野生型小鼠有顯著減少。
　　結(jié)論:
　　1.FKBP38肝臟特異敲除小鼠模型構(gòu)建成功。
　　2.肝臟中缺失FKBP38，小鼠的空腹血糖水平顯著下降。
　　3.小鼠肝臟