脈脹理論及益氣化痰法治療高血壓的臨床與實驗研究.pdf

1、第一部分臨床研究
　　第一節(jié)高血壓中醫(yī)診斷與辨證規(guī)律臨床專家問卷調(diào)查研究
　　目的:
　　通過對全國范圍內(nèi)的中醫(yī)臨床一線專家進行專家問卷調(diào)查，總結中醫(yī)臨床專家對高血壓病的中醫(yī)認識及脈脹理論的科學性、合理性和實用性，為脈脹理論形成提供臨床實踐支撐，為創(chuàng)新高血壓中醫(yī)診治新方案及制定高血壓中西醫(yī)結合診治中國專家共識提供臨床依據(jù)。
　　方法:
　　制定高血壓中醫(yī)診斷及辨證規(guī)律臨床專家調(diào)查問卷，采用面呈專家直接填寫、

2、信函法及網(wǎng)絡調(diào)查等方式進行。經(jīng)過各位專家填寫完畢后收回，進行統(tǒng)計處理，調(diào)查結果運用Epidate3.0軟件建立數(shù)據(jù)庫，SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　?。ㄒ唬┮话闱闆r
　　1.專家問卷調(diào)查共有19個省自治區(qū)直轄市的53家醫(yī)院參與，累計收集專家調(diào)查問卷529份，6份信息缺失，回收率100.0％，有效率98.9％。
　　2.接受問卷調(diào)查的523名專家，男性270名，女性253名，最小30歲，最大年齡

3、65歲，平均年齡40.55±7.77歲;中級職稱醫(yī)師218名，占總人數(shù)的41.7％，副高職稱醫(yī)師176名，占總人數(shù)的33.6％，正高級職稱醫(yī)師129名，占總人數(shù)的24.7％。
　?。ǘ└哐獕翰≈嗅t(yī)診治調(diào)查
　　1.高血壓病常見癥狀:血壓患者就診的癥狀除了常見的眩暈、頭脹、頭痛等，也存在有混合型（同時存在眩暈、頭痛、頭脹等）和無癥狀患者，無癥狀患者出現(xiàn)率并不少見。
　　2.高血壓傳統(tǒng)病名認可度:92.9％專家認為眩暈不

4、能等同于高血壓;98.5％專家認為頭痛不能等同于高血壓;87.2％認為風眩不能等同于高血壓;485(92.7％)名專家贊同和考慮采納新的合適更加合適的中醫(yī)病名對應高血壓的中醫(yī)診斷。
　　3.高血壓中醫(yī)病位調(diào)查:85.9％專家認為在血脈;66.5％專家認為高血壓病位在五臟;34.8％專家認為在六腑;其他病位尚有沖任、清竅、絡脈等。
　　4.高血壓病辨證方法:389(74.4％)名專家采用臟腑辨證;365(69.8％)名專家采用

5、血脈辨證;173(33.1％)名專家采用八綱辨證;93(17.8％)名專家采用六經(jīng)辨證;7(1.3％)名專家采用其他辨證。
　　5.高血壓常見單一證候調(diào)查:高血壓病常見的單一證候為陽亢證、痰濁證、血瘀證、陰虛證、氣郁（滯）證、火熱證、氣虛證、陽虛證、血虛證。
　　6.高血壓中醫(yī)常見復合證型:對臨床常見的11種復合證型進行了相關調(diào)查，結果顯示陰虛陽亢證、肝陽上亢證、痰瘀互結證、痰濁中阻證、肝腎陰虛證為最常見類型，氣血虧虛、陰陽

6、兩虛較少見。
　?。ㄈ懊}脹”理論調(diào)查
　　1.臨床專家對脈脹熟悉度調(diào)查:523名專家中，熟悉“脈脹”理論的專家只有36(6.9％)名;了解“脈脹”理論專家108(20.7％)名;聽說過“脈脹”理論專家232(44.4％)名;沒有聽說過“脈脹”理論專家有147(28.1％)名。
　　2.把“脈脹”作為高血壓中醫(yī)病名的認可度調(diào)查:認為“脈脹”作為高血壓病名合理的專家有459(87.8％)名，而認為不合理的專家有64(1

7、2.2％)名。
　　結論:
　　1.結合高血壓常見癥狀調(diào)查，顯示傳統(tǒng)高血壓中醫(yī)病名運用不合理。
　　2.大多數(shù)專家認為高血壓病位在血脈，運用血脈辨證是合理的。
　　3.高血壓病單一證候最多常見的為陽亢證、痰濁證、血瘀證;復合證型中最常見的為陰虛陽亢證、肝陽上亢證、痰瘀互結證。痰濁、血瘀是高血壓病的基本病理基礎。
　　4.大多數(shù)專家認為把“脈脹”作為高血壓病名合理，“脈脹”理論合理性得到專家認可。
　　

8、第二節(jié)復方芪麻膠囊治療高血壓病meta分析
　　目的:
　　通過對復方芪麻膠囊治療原發(fā)性高血壓病的臨床研究進行meta分析，系統(tǒng)評價復方芪麻膠囊治療原發(fā)性高血壓病的有效性及安全性，為復方芪麻膠囊在臨床運用及推廣提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　檢索2016年1月30日之前中國知網(wǎng)(CNKI)、萬方數(shù)據(jù)和維普資訊全文數(shù)據(jù)庫（會議、期刊、學位論文數(shù)據(jù)庫），收錄的關于復方芪麻膠囊降壓、靶器官保護、改善脂代謝及不良反應等方

9、面的文獻。根據(jù)納入和排除標準選取文獻，對納入的文獻采用RevMan5.3軟件進行分析。效應量以加權均數(shù)差(WMD)或比值比(OR)及其95％置信區(qū)間(95％CI)表示。先進行異質性x2檢驗，若研究間無異質性(P≥0.10，I2≤50％)時，采用固定效應模型進行效應統(tǒng)計;若研究間有異質性（P＜0.10，I2＞50％），采用隨機效應模型-亞組分組進行效應統(tǒng)計;效應對比采用Z檢驗(假設檢驗水準α=0.05)，結果以森林圖列出。并以漏斗圖檢驗發(fā)

10、表性偏倚。
　　結果:
　　（一）文獻納入結果
　　根據(jù)檢索策略方法檢索出全文文獻后，去除不符合合格文獻，共納入26篇符合要求文獻，全部文獻均進行可比性假設檢驗且均具有可比性。
　　（二）對治療總體臨床療效的影響
　　共有16篇文獻報道了復方芪麻膠囊對高血壓病患者治療總有效率的影響，復方芪麻膠囊單獨或與西藥合用治療748例、對照組治療631例高血壓患者。復方芪麻膠囊單獨運用或聯(lián)合西藥治療后高血壓病患者總有效

11、率較對照組有顯著改善，有顯著性差異（P＜0.01）。
　?。ㄈρ獕旱挠绊?br>　　1.對收縮壓的影響:共19篇文獻均報道了復方芪麻膠囊對高血壓病患者收縮壓的影響，復方芪麻膠囊單獨或與西藥合用治療806例、對照組治療720例高血壓患者。復方芪麻膠囊治療后高血壓病患者收縮壓較對照組有顯著性降低（P＜0.05）。
　　2.對舒張壓的影響:共19篇文獻均報道了復方芪麻膠囊對高血壓病患者舒張壓的影響，其中復方芪麻膠囊單獨或與西藥

12、合用治療806例、對照治療720例高血壓病患者。復方芪麻膠囊治療后高血壓病患者舒張壓較對照組無顯著性差異(P＞0.05)。
　?。ㄋ模χ嗅t(yī)證候積分的影響
　　共13篇文獻均報道了復方芪麻膠囊對高血壓病患者癥狀積分的的影響，復方芪麻膠囊單獨或與西藥合用治療481例、對照組治療475例高血壓病患者。復方芪麻膠囊治療后高血壓病患者證侯積分較對照組有顯著降低(P＜0.01)。
　?。ㄎ澹┎涣挤磻?br>　　共16篇文獻報道了

13、復方芪麻膠囊在治療過程發(fā)生的不良反應，其中2篇文獻報道了口干，未具體說明例數(shù);5篇文獻報道了9例患者出現(xiàn)干咳;1篇文獻報道出現(xiàn)腹痛腹瀉，未具體說明例數(shù);8篇文獻報道在整個研究過程中無不良反應發(fā)生。16篇報道中，復方芪麻膠囊單獨或與西藥合用治療520例、對照組治療503例高血壓病患者。復方芪麻膠囊治療后高血壓病患者不良反應發(fā)生率較對照組有顯著性減少(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.與對照組比較，復方芪麻膠囊可顯著改善高血

14、壓病患者治療的總體臨床療效。
　　2.與對照組比較，復方芪麻膠囊可顯著降低高血壓病患者收縮壓，但對舒張壓作用不明顯。
　　3.與對照組比較，復方芪麻膠囊治療后高血壓病患者證侯療效較對照組有顯著改善，復方芪麻膠囊可顯著降低高血壓病患者癥狀積分。
　　4.與對照組比較，復方芪麻膠囊發(fā)生干咳或微咳等不良反應的發(fā)生率較低。
　　第二部分實驗研究
　　目的:
　　觀察復方芪麻膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠收縮壓、血管內(nèi)

15、皮舒縮因子—NO、ET-1、AngⅡ、ACE、ACE2、Ang（1-7）血清含量水平，頸動脈Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白在自發(fā)性高血壓大鼠頸動脈中的表達，及ACE2-Ang（1-7）-Mas-ERK通路中各信號分子含量在心肌組織中表達的影響，探討復方芪麻膠囊對高血壓內(nèi)皮源性血管活性因子釋放的調(diào)節(jié)，以及對高血壓進程中造成的頸動脈血管重構、心室重構的改善作用，為中醫(yī)藥在高血壓領域的臨床應用提供可靠的依據(jù)。
　　方法:
　　50只SHR大鼠

16、，適應性喂養(yǎng)1周后，稱重，根據(jù)體重隨機將大鼠分為5組，即SHR組（蒸餾水，10ml/Kg/d）、厄貝沙坦膠囊組（厄貝沙坦膠囊，13.5mg/Kg/d）、厄貝沙坦膠囊+復方芪麻組（厄貝沙坦膠囊，13.5mg/Kg/d+復方芪麻膠囊，1.8576g/Kg/d）、芪麻低劑量組（復方芪麻膠囊，1.8576g/Kg/d）和芪麻高劑量組(復方芪麻膠囊，9.288g/Kg/d)，每組各10只，雌雄各半。另外以10只WKY大鼠為正常對照組（蒸餾水，10

17、ml/Kg/d）。分別將復方芪麻膠囊及厄貝沙坦膠囊配成溶液，每日灌胃一次，療程共為16周。各組大鼠在初次給藥前、給藥后每隔2周采用美國CODA-2大鼠無創(chuàng)鼠尾血壓測量系統(tǒng)進行血壓監(jiān)測。
　　干預結束后，各組大鼠禁食24小時后稱重，用10％水合氯醛進行大鼠腹腔麻醉(0.3ml/100g)，完全麻醉后將大鼠仰臥固定于鼠臺上，用75％酒精消毒大鼠腹部皮膚，用組織剪迅速剪開腹腔，暴露腹主動脈，利用采血針從腹主動脈進行采血，血液標本靜置后放

18、入離心機中，以3000rpm/min速度離心10min，離心后小心吸取上層淡黃色透明液體（血漿），裝入標記好的EP管中，置于-70℃冰箱凍存?zhèn)溆?，用ELISA法檢測SHR血清NO、ET-1、AngⅡ、ACE、ACE2、Ang（1-7）含量;取血結束后用組織剪迅速剪開胸腔，充分暴露心臟，取左心室置于甲醛溶液中固定以行病理HE染色，取心臟組織約200mg裝入EP管中，置于-70℃冰箱凍存以備Western Blot檢測pERK1/2蛋白水平

19、表達，實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測ACE、ACE2及Mas mRNA水平;充分暴露并完全分離出頸動脈，除去血管周圍組織，剪下血管并置于預冷的生理鹽水中進行沖洗，剪取約1cm的頸動脈置于甲醛溶液中固定行病理HE染色及免疫組化檢測用，剩余的血管裝入EP管中，置于-70℃冰箱凍存以備后期檢測使用。
　　結果:
　?。ㄒ唬头杰温槟z囊對SHR大鼠收縮壓水平的影響:
　　1.治療前:SHR組、厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦

20、膠囊組+芪麻組、芪麻低劑量組及芪麻高劑量組SBP均高于WKY組，有顯著性差異（P＜0.01）;SHR組、厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻低劑量組、芪麻高劑量組，各組間兩兩比較，SBP水平無差異，（P＞0.05），具有可比性。
　　2.治療后:第2周時，厄貝沙坦膠囊組血壓開始下降，與芪麻低劑量組比較，有顯著性差異(P＜0.05);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻低劑量組及芪麻高劑量組SBP水平

21、無顯著變化，（P＞0.05）;用藥4周、6周后與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻低劑量組及芪麻高劑量組SBP水平無顯著變化（P＞0.05）。用藥8周、10周、12周后厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組SBP水平降低，與SHR組相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。用藥14周、16周時與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻高劑量組SBP水平顯著降低，有顯著性差異（P＜0.05）。
　　

22、3.與治療前相比:厄貝沙坦膠囊組，第2周時SBP出現(xiàn)下降，有顯著性差異(P＜0.05)，第4周、6周SBP無顯著改變(P＞0.05)，第8周后，SBP出現(xiàn)明顯降低，有顯著性差異（P＜0.01）;厄貝沙坦膠囊組+芪麻組，從第8周開始SBP出現(xiàn)顯著下降(P＜0.01);芪麻高劑量組，從第10周開始SBP出現(xiàn)下降（P＜0.05或P＜0.01）:芪麻低劑量組則無顯著改變(P＞0.05)。
　?。ǘ头杰温槟z囊對SHR大鼠血清中NO、ET

23、-1、AngⅡ、ACE水平的影響
　　1.血清NO:與WKY組相比，SHR組血清NO水平低于WKY組，有顯著性差異（P＜0.01）;與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻高劑量組血清NO水平升高，有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)。
　　2.血清ET-1:與WKY組相比，SHR組血清ET-1水平明顯升高，有顯著性差異（P＜0.01）;與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組+芪麻組血清ET-1水平明顯下降

24、，有顯著性差異（P＜0.01）;芪麻高劑量組血清ET-1水平也下降明顯，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　3.血清ACE:與WKY組相比，SHR組血清ACE水平升高，有顯著性差異（P＜0.05）;與SHR組相比，芪麻高劑量組血清ACE水平顯著降低，有顯著性差異（P＜0.05）。
　　4.血清AngⅡ:與WKY組相比，SHR組血清AngⅡ濃度升高，有顯著性差異(P＜0.01);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+

25、芪麻組、芪麻低劑量組、芪麻高劑量組AngⅡ水平明顯下降，有顯著性差異(P＜0.05)。
　?。ㄈ头杰温槟z囊對SHR大鼠血管重構的影響
　　1.各組大鼠心肌病理形態(tài)學的改變:經(jīng)HE染色后觀察，WKY組頸動脈內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細胞完整，無脫落，中膜平滑肌細胞排列整齊，無細胞增生;SHR組頸動脈內(nèi)膜不光滑，內(nèi)皮細胞可見部分脫落，中膜平滑肌細胞肥大增生，排列不規(guī)則;厄貝沙坦組、厄貝沙坦+芪麻組可見頸動脈內(nèi)皮光滑，無內(nèi)皮細胞脫落，細胞

26、排列規(guī)則，未見平滑肌細胞增生;芪麻低劑量組、芪麻高劑量組頸動脈內(nèi)皮細胞偶有脫落，中膜平滑肌細胞排列整齊;彈性纖維排列有序。
　　2.各組大鼠頸動脈Ⅰ型膠原蛋白表達:WKY組Ⅰ型膠原蛋白表達主要在中膜平滑肌胞漿內(nèi)，表達處于正常狀態(tài);與WKY組相比，SHR組Ⅰ型膠原蛋白表達顯著上升(P＜0.05);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦+芪麻組、芪麻膠囊低劑量組Ⅰ型膠原蛋白表達降低(P＜0.05)。
　　3.各組頸動脈Ⅲ型膠原

27、蛋白表達:與WKY組相比，SHR組Ⅲ型膠原蛋白表達顯著上升(P＜0.05);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦+芪麻組Ⅲ型膠原蛋白表達降低(P＜0.05)，有顯著性差異。
　　（四）復方芪麻膠囊對ACE2-Ang（1-7）-Mas-ERK信號通路的影響
　　1.血清ACE2:與WKY組相比，SHR組血清ACE2水平降低，有顯著性差異(P＜0.01):與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻高劑量組血清ACE2水平明

28、顯升高，有顯著性差異（P＜0.05）。
　　2.血清Ang（1-7）:與WKY組相比，SHR組血清Ang（1-7）水平降低，有顯著性差異(P＜0.01);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦膠囊組+芪麻組、芪麻高劑量組血清Ang（1-7）水平明顯升高，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　3.pERK1/2蛋白水平表達:與WKY組相比，SHR組pERK1/2蛋白表達水平上升(P＜0.05);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、

29、厄貝沙坦+芪麻組、芪麻高劑量組pERK1/2蛋白的表達水平顯著降低（P＜0.05）。
　　4.ACE mRNA水平表達:與WKY組相比，SHR組ACE mRNA表達顯著上升(P＜0.01);與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、芪麻高劑量組ACE mRNA表達水平顯著下降（P＜0.05）。
　　5.ACE2 mRNA水平表達:與WKY組相比，SHR組ACE2 mRNA表達降低（P＜0.05）;與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊+芪麻組A

30、CE2 mRNA表達水平上升（P＜0.05）。
　　6.Mas mRNA水平表達:與WKY組相比，SHR組Mas mRNA表達顯著降低（P=＜0.01）;與SHR組相比，厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦+芪麻組、芪麻高劑量組Mas mRNA表達水平上升(P＜0.05)。
　　7.各組大鼠心肌病理形態(tài)學的改變:各組大鼠心肌組織經(jīng)HE染色后，置于光鏡下觀察，WRY組大鼠心肌細胞排列規(guī)則，大小正常，纖維、胞漿染色均勻;SHR組部分心肌排列

31、紊亂、斷裂，部分心肌細胞肥大，胞漿染色加深;厄貝沙坦膠囊組、厄貝沙坦+芪麻組可見心肌細胞無明顯肥大，細胞排列整齊;芪麻低劑量組、芪麻高劑量組心肌細胞尚排列整齊，心肌細胞肥大減輕。
　　結論:
　　1.復方芪麻膠囊高劑量可降低自發(fā)性高血壓大鼠收縮壓。
　　2.復方芪麻膠囊能夠上調(diào)SHR血清中NO水平，降低血清中ET-1、AngⅡ、ACE水平。
　　3.復方芪麻膠囊高劑量組及復方芪麻膠囊聯(lián)合西藥組可降低頸動脈Ⅰ型、Ⅲ

32、型膠原蛋白表達。
　　4.高劑量復方芪麻膠囊、復方芪麻膠囊聯(lián)合西藥組均可上調(diào)SHR大鼠血清中ACE2、Ang（1-7）水平。
　　5.復方芪麻膠囊聯(lián)合西藥可增強SHR大鼠心肌組織中ACE2 mRNA表達;復方芪麻膠囊聯(lián)合西藥組、高劑量復方芪麻膠囊可提高SHR心肌組織中Mas mRNA表達;復方芪麻膠囊低、高劑量對ACE mRNA表達無優(yōu)勢。
　　6.高劑量復方芪麻膠囊可降低SHR大鼠心肌組織中pERK1/2蛋白的表達。