槐耳清膏對人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞株增殖與凋亡的影響研究.pdf

1、目的：探討不同濃度的槐耳清膏對人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞株的增殖、凋亡的影響。
　　方法：將人早幼粒白血病細(xì)胞株HL-60培養(yǎng)至對數(shù)生長期，以不同濃度槐耳清膏（0mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml）分別培養(yǎng)HL-60細(xì)胞24h，48h和72h，0mg/ml為對照組，2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml為實(shí)驗(yàn)組，收集各分組的細(xì)胞，臺盼藍(lán)染色后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)初步判讀槐耳清膏對H

2、L-60細(xì)胞增殖的影響；采用CCK-8細(xì)胞增殖活性檢測法檢測上述濃度槐耳清膏培養(yǎng)細(xì)胞24h，48h和72h后的吸光度，分析槐耳清膏對HL-60細(xì)胞的增殖抑制作用；應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測分析槐耳清膏對HL-60細(xì)胞凋亡的影響。
　　結(jié)果：1.在倒置顯微鏡下觀察加入槐耳清膏培養(yǎng)48h后，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的升高，作用時間的延長，HL-60細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，細(xì)胞密度下降，折光性減低，胞體變小，細(xì)胞皺縮、破

3、裂。
　　2.通過細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，不同濃度的槐耳清膏（2、4、8和16 mg/ml）分別作用于HL-60細(xì)胞24h、48h和72h后，實(shí)驗(yàn)組除2mg/ml組在48小時外，其余各槐耳清膏濃度組HL-60細(xì)胞數(shù)在各個時間均較對照組相應(yīng)時間的細(xì)胞數(shù)減少，變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。
　　3. CCK-8增殖活性檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度的槐耳清膏（2、4、8和16 mg/ml），對HL-60細(xì)胞的抑制率與陰性對照組相比，均有

4、顯著性差異（P＜0.001）。在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml)，隨著藥物濃度的增加，作用時間的延長，抑制率明顯升高。16mg/ml槐耳清膏組48小時與72小時的抑制率相比，結(jié)果沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4. Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)分析研究槐耳清膏對HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的結(jié)果顯示，不同濃度（2、4、8和16 mg/ml）的槐耳清膏分別作用于HL-60細(xì)胞24h，48h和72h，細(xì)胞凋亡率高

5、于對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。培養(yǎng)時間在24h和48h時間點(diǎn)，細(xì)胞凋亡率隨著藥物濃度的增加，凋亡率逐漸升高。當(dāng)培養(yǎng)時間達(dá)到72小時，各不同濃度實(shí)驗(yàn)組凋亡率與對照組相比，細(xì)胞凋亡率均增加，統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異；但各不同濃度組實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較，結(jié)果均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.0784）
　　結(jié)論：1.不同濃度的槐耳清膏（2、4、8和16 mg/ml），可抑制HL-60細(xì)胞增殖，在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml)，隨著藥物濃度的增加，