版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、抗菌藥物的廣泛不合理使用,細(xì)菌的耐藥性亦日趨嚴(yán)重,超級(jí)細(xì)菌已在世界各地均有發(fā)現(xiàn)。為避免細(xì)菌感染,人們往往會(huì)采取使用各類消毒劑的方式來對(duì)環(huán)境加以消毒,以減少感染病原菌的機(jī)會(huì),然而,隨著消毒劑的廣泛不合理使用,細(xì)菌對(duì)消毒劑也同樣產(chǎn)生了耐藥性,本教研室前期研究表明細(xì)菌對(duì)消毒劑和抗菌藥物的耐藥具有交叉性,即對(duì)抗菌藥物耐藥的細(xì)菌對(duì)消毒劑有一定耐受性,反之,對(duì)消毒劑耐藥的細(xì)菌對(duì)抗菌藥物亦具有耐藥性。但當(dāng)前關(guān)于細(xì)菌對(duì)消毒劑與抗菌藥物間交叉耐藥的機(jī)制未
2、有確切報(bào)道,為探究交叉耐藥機(jī)制開展了本課題的研究,旨在為臨床合理使用抗菌藥物和消毒劑提供理論依據(jù)。
1、體外誘導(dǎo)大腸埃希菌ATCC25922獲得多重耐藥菌株
基于前期研究選擇了可誘導(dǎo)大腸埃希菌產(chǎn)生耐藥的消毒劑苯扎溴銨及在臨床使用中易導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的土霉素為試驗(yàn)藥物,采用微量肉湯稀釋法測(cè)定土霉素及苯扎溴銨對(duì)大腸埃希菌質(zhì)控菌ATCC25922的MIC。采用多步法分別以亞抑菌濃度(1/2MIC)的土霉素和苯扎溴銨為起點(diǎn)
3、對(duì)質(zhì)控菌ATCC25922進(jìn)行體外誘導(dǎo),并檢測(cè)誘導(dǎo)前后土霉素和苯扎溴銨對(duì)受試菌株的最小抑菌濃度(MIC)變化情況。
結(jié)果:通過體外誘導(dǎo)獲得了對(duì)土霉素和苯扎溴銨均耐藥的菌株A(Oxy)和A(Ben):土霉素對(duì)A(Ben)的MIC是誘導(dǎo)前的250倍,對(duì)A(Oxy)的MIC是誘導(dǎo)前的320倍,苯扎溴銨對(duì)A(Oxy)和A(Ben)的MIC均是誘導(dǎo)前的18倍。
結(jié)論:土霉素和苯扎溴銨分別誘導(dǎo)大腸埃希菌后可獲得對(duì)消毒劑苯扎溴銨和
4、土霉素均耐藥的菌株。
2、AcrAB-TolC在交叉耐藥菌株中的作用研究
檢測(cè)誘導(dǎo)所得耐藥菌株A(Oxy)和A(Ben)的外排泵基因acrA/B、tolC及其調(diào)控基因marA、soxS、rob較誘導(dǎo)前的變異情況;測(cè)定A(Oxy)和A(Ben)的marA、soxS、rob、acrA、acrB、tolC mRNA表達(dá)量較誘導(dǎo)前的變化情況。并將A(Oxy)和A(Ben)制備成感受態(tài)細(xì)胞,設(shè)計(jì)針對(duì)marA的siRNA,測(cè)定在
5、分別含有不同濃度的土霉素和苯扎溴銨的培養(yǎng)基中加入siRNA后對(duì)大腸埃希菌生長的影響。將marA基因連入質(zhì)粒構(gòu)建可過量表達(dá)marA的大腸埃希菌,測(cè)定土霉素、苯扎溴銨對(duì)該菌株的MIC,從正向進(jìn)一步研究marA表達(dá)量變化對(duì)大腸埃希菌對(duì)藥物敏感性的影響,進(jìn)而闡釋AcrAB-TolC在大腸埃希菌對(duì)土霉素和苯扎溴銨交叉耐藥中的作用。
結(jié)果:A(Oxy)和A(Ben)的marA、soxS、rob、acrA、acrB、tolC的基因序列和氨基
6、酸序列與質(zhì)控菌相應(yīng)序列相比均有不同程度的突變,且A(Oxy)和A(Ben)所有基因堿基序列都有相同位點(diǎn)發(fā)生突變,除rob和acrA外其余基因的氨基酸序列也有在相同位點(diǎn)發(fā)生突變。A(Oxy)和A(Ben)的marA、acrA、acrB、tolC表達(dá)量均顯著或極顯著增加,soxS、rob極顯著減少。
RNA干擾試驗(yàn)中,含有1/2MIC土霉素的各試驗(yàn)組菌液的OD595值在第2小時(shí)到第8小時(shí)時(shí)段內(nèi)顯著或極顯著低于陰性對(duì)照組;加入低于M
7、IC濃度的土霉素或苯扎溴銨的各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異均不顯著;含有大于或等于MIC濃度土霉素或苯扎溴銨的各試驗(yàn)組細(xì)菌未生長。
成功構(gòu)建了可過量表達(dá)marA的大腸埃希菌,且土霉素、苯扎溴銨對(duì)構(gòu)建的可過量表達(dá)marA的大腸埃希菌Arctic Express-MarA的MIC值分別是原核宿主菌Arctic Express的64倍和4倍。
結(jié)論:誘導(dǎo)所得耐藥菌株A(Oxy)和A(Ben)外排泵基因acrA/B、tolC及其調(diào)
8、控基因marA、soxS、rob的基因突變及表達(dá)量變化可能對(duì)AcrAB-TolC的表達(dá)量有影響,也表明大腸埃希菌對(duì)土霉素和苯扎溴銨的交叉耐藥與外排泵AcrAB-TolC有關(guān),且marA基因?qū)crA/B、tolC的正向調(diào)控作用是土霉素與苯扎溴銨之間交叉耐藥的重要作用機(jī)制。
從以上試驗(yàn)結(jié)果可以說明,常見抗菌藥物與消毒劑之間存在交叉耐藥性,其交叉耐藥機(jī)制與外排泵耐藥機(jī)制具有高度相關(guān)性,提示人類日常生活及畜牧業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)防范濫用該兩類
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大腸埃希菌多重耐藥外排泵AcrAB-Tolc主動(dòng)外排機(jī)制的研究.pdf
- 大腸埃希菌對(duì)恩諾沙星及苯扎溴銨交叉耐藥變遷的分子機(jī)制研究.pdf
- 細(xì)菌AcrAB-TolC外排泵在幽門螺桿菌耐藥中的作用及機(jī)制.pdf
- 主動(dòng)外排系統(tǒng)AcrAB-TolC介導(dǎo)的大腸桿菌多重耐藥性的研究.pdf
- 志賀菌主動(dòng)外排泵AcrAB-TolC的基因調(diào)控研究.pdf
- AcrAB-TolC外排泵系統(tǒng)對(duì)肺炎克雷伯菌耐藥性和黏附侵襲能力的影響.pdf
- AcrAB-TolC主動(dòng)外排泵與宋內(nèi)志賀菌多重耐藥關(guān)系的研究.pdf
- 尿液來源大腸埃希菌對(duì)磷霉素耐藥性及其耐藥機(jī)制研究.pdf
- 多重藥物外排泵AcrAB-TolC在耐氟喹諾酮大腸桿菌臨床株中的作用.pdf
- 氟喹諾酮耐藥志賀菌臨床分離株AcrAB-TolC外排泵表達(dá)水平與耐藥關(guān)系的研究.pdf
- 多重耐藥大腸埃希菌耐藥的分子機(jī)制研究.pdf
- 苦豆子堿對(duì)耐藥性大腸桿菌ESBLs活性和AcrAB-TolC表達(dá)量影響的研究.pdf
- AcrAB-TolC多重耐藥性外排泵體系構(gòu)象變化及轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理的計(jì)算模擬研究.pdf
- 耐喹諾酮類大腸埃希菌耐藥機(jī)制研究.pdf
- (一)碳青霉烯類抗生素體外抗菌活性及其耐藥機(jī)制研究;(二)重組大腸埃希菌AcrAB外排泵的構(gòu)建.pdf
- 大腸埃希菌對(duì)阿莫西林-克拉維酸耐藥機(jī)制的研究.pdf
- 大腸埃希菌aac(3)-Ⅱ耐藥基因的研究.pdf
- 粉防己甲素逆轉(zhuǎn)多重耐藥大腸埃希菌外排喹諾酮類藥物機(jī)制的研究.pdf
- 磷霉素對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌接種效應(yīng)的研究.pdf
- 磷霉素對(duì)大腸埃希菌及銅綠假單胞菌耐藥突變選擇窗的體內(nèi)外研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論