靶向ELAM-1的磁共振分子探針USPIO-PEG-sLex的制備及體內(nèi)外MR成像研究.pdf

1、目的：
　　1、探討利用超小順磁性氧化鐵(USPIO)偶聯(lián)唾液酸化酶x(sLex)構(gòu)建靶向內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（ELAM-1）的特異性磁共振成像的分子探針的制備方式，并研究其物理化學(xué)特征。
　　2、采取裸鼠構(gòu)建鼻咽癌移植瘤模型，探究超小順磁性氧化鐵(USPIO)偶聯(lián)唾液酸化酶x(sLex)構(gòu)成靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1(ELAM-1)的特異性磁共振成像的分子探針(USPIO-PEG-sLex)在鼻咽癌移植瘤的運(yùn)用價(jià)值。

2、r>　　方法：
　　利用物理沉積方法合成USPIO納米顆粒，通過(guò)疏水作用，合成較好水溶性的USPIO-PEG，其表面-COOH充分活化，常溫下與sLex充分孵育，超濾離心和去離子水洗滌，形成磁共振分子探針USPIO-PEG-sLex。采用透射電子顯微鏡(TEM)分析USPIO-PEG-sLex的形態(tài)和粒徑，動(dòng)態(tài)光散射(DLS)分析偶聯(lián)前與偶聯(lián)后USPIO-PEG-sLex的平均水動(dòng)力尺寸，粒徑分析儀檢測(cè)偶聯(lián)前后USPIO-PEG-

3、sLex的Zeta電位。
　　將10只鼻咽癌裸鼠移植瘤模型隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，分別于尾靜脈注入U(xiǎn)SPIO-PEG-sLex和USPIO-PEG前后行磁共振T2 mapping成像，比較分析注射造影劑前后移植瘤的T2值變化。MRI掃描完后取移植瘤組織，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)分析腫瘤組織新生血管內(nèi)皮細(xì)胞上ELAM-1的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　透射電鏡測(cè)定USPIO-PEG平均粒徑為10±2.6nm，分散性較好，大小適

4、宜;動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定偶聯(lián)前后其平均水動(dòng)力尺寸分別為(34.06±9.95)nm，(53.35±16.99) nm;偶聯(lián)前的PEG化磁性納米顆粒的Zeta電位為(11.6±3.96) mV，偶聯(lián)后為(-12.6±5.33) mV。
　　USPIO-PEG-sLex具有良好表征。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的鼻咽癌移植瘤的平掃T2值差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，增強(qiáng)掃描后兩組的T2值下降，兩組的T2值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組的強(qiáng)

5、化率更低，兩組的強(qiáng)化率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)組中瘤體與肌肉的強(qiáng)化率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。免疫組化結(jié)果顯示E-選擇素蛋白在血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿或胞膜呈棕黃色表達(dá)。HE染色結(jié)果顯示胞核為深藍(lán)色且具有顯著異型性，胞漿及纖維組織為深淺不一的紅色。
　　結(jié)論：
　　化學(xué)交聯(lián)法可成功制備磁共振分子探針USPIO-PEG-sLex，該分子探針的表征良好，有望用于體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)特異性地結(jié)合ELAM-1。USPIO-PE