維生素E對臭氧暴露誘發(fā)小鼠急性肺部損傷的保護(hù)機(jī)制.pdf

1、目前，隨著汽車保有量及工業(yè)排放的增加，近地面的臭氧(O3)已成為中國主要的空氣污染物之一，研究表明臭氧污染會(huì)對人類的身體健康產(chǎn)生不利影響，尤其是會(huì)給人類的呼吸系統(tǒng)帶來嚴(yán)重威脅。同其他大氣污染物一樣，臭氧也來源于人類活動(dòng)，如汽車排放的尾氣、石化燃料廢氣的排放等。臭氧即我們所熟知的棕色氣體光化學(xué)煙霧的主要成分，它是汽車等排放的氮氧化物在紫外光照條件下轉(zhuǎn)化生成的一種低空大氣污染物。由于臭氧分子結(jié)構(gòu)的特殊性，它具有強(qiáng)氧化性，幾乎能與任何生物組織

2、反應(yīng)。當(dāng)暴露于臭氧時(shí)，首先會(huì)導(dǎo)致肺功能減弱和組織損傷。對于氣喘病、肺氣腫和慢性支氣管炎等肺部患者來說，臭氧對他們的危害更為顯著。因此本研究通過設(shè)置不同程度的臭氧暴露，來探究臭氧的毒性效應(yīng)濃度，并通過氧化損傷阻斷劑VE的使用探究臭氧誘導(dǎo)肺部炎癥的機(jī)制，為今后臭氧的防治提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本研究主要集中探究維生素E減輕小鼠肺部氧化損傷水平的可能性分子機(jī)制:是否會(huì)通過促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)中Keap1與Nrf2的解離，進(jìn)而使Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核

3、中啟動(dòng)一系列抗氧化基因，如NQO-1、HO-1等的表達(dá)，從而使小鼠肺部氧化損傷的水平降低，達(dá)到減輕小鼠肺部損傷的作用。本實(shí)驗(yàn)通過觀察肺組織病理學(xué)切片（H&E染色）、肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)(Bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中炎癥細(xì)胞的數(shù)量（淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞）以及肺功能的測定來評價(jià)臭氧的暴露對小鼠肺部的影響。同時(shí)通過檢測小鼠肺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)，包括丙二醛(MDA)與谷胱甘肽(GSH)，炎癥

4、指標(biāo)包括Th2性細(xì)胞因子:白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-13(IL-13);Th1型細(xì)胞因子:γ-干擾素(IFN-γ);免疫球蛋白E(IgE)與肥大細(xì)胞的含量;胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)以及核轉(zhuǎn)錄因子(Nrf2)、醌氧化還原酶(NQO-1)、血紅素氧合酶1(HO-1)來探究VE減輕臭氧暴露后小鼠肺部損傷的可能性機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，與生理鹽水組相比，中高濃度臭氧暴露組(0.5 ppm，1.0

5、ppm)肺部氧化應(yīng)激水平升高，MDA含量升高，GSH含量下降;血清IgE含量上升;炎性細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-13的表達(dá)水平顯著增加，IFN-γ的表達(dá)水平顯著減小，TSLP表達(dá)水平增加，Th1/Th2免疫平衡被打破并向Th2方向移動(dòng);同時(shí)，小鼠BALF中淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目增多，H&E染色顯示氣道重塑，膠原沉積，粘液分泌增多;肺功能測定小鼠吸氣、呼氣阻力均上升，肺順應(yīng)性下降。高濃度臭氧暴露組腹腔注射V

6、E后能夠通過Nrf2、NQO-1及HO-1表達(dá)的上調(diào)有效減輕這些影響，降低肺組織的病理學(xué)損傷，減弱氣道高反應(yīng)性(airwayhyperresponsiveness，AHR)的發(fā)生。
　　本項(xiàng)研究表明，大于0.05 ppm的臭氧暴露可以誘導(dǎo)由氧化應(yīng)激介導(dǎo)的小鼠肺部炎癥的發(fā)生，加入抗氧化劑VE后小鼠的氧化應(yīng)激水平降低，肺部炎癥水平也有顯著減輕，且Nrf2通路相關(guān)抗氧化基因表達(dá)量上調(diào)，說明Nrf2通路是VE保護(hù)臭氧誘導(dǎo)的小鼠肺部炎癥的可