幽門螺桿菌相關(guān)胃疾病中miRNA100的表達(dá)及意義研究.pdf

1、目的：通過檢測miRNA-100在幽門螺桿菌感染（H.pylori）及非感染的胃癌組織、胃癌癌前病變組織、慢性非萎縮性胃炎胃粘膜組織中的表達(dá)情況，比較其在胃癌組織、胃癌癌前病變組織及慢性非萎縮性胃炎胃粘膜組織中的表達(dá)差異，及分別在H.pylori感染及非感染的胃癌組織、胃癌癌前病變組織、慢性非萎縮性胃炎胃粘膜組織中的表達(dá)差異，并將胃癌組織中miRNA-100的表達(dá)與患者的臨床病理特征相比較。觀察miRNA-100在H.pylori感染相

2、關(guān)性胃疾病中表達(dá)的特點(diǎn)，用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析miRNA-100的表達(dá)水平與各臨床病理特征之間有無相關(guān)性，探討miRNA-100與H.pylori感染相關(guān)性胃疾病間的關(guān)系；預(yù)測和鑒定了miRNA-100的靶基因，探索 miRNA-100參與胃癌發(fā)生的可能的分子作用機(jī)制。
　　方法：30例胃癌手術(shù)標(biāo)本，收集于蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院普外科手術(shù)室及腫瘤外科手術(shù)室，10例胃癌癌前病變標(biāo)本及30例慢性淺表性胃炎組織標(biāo)本均采集于蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)

3、院消化內(nèi)鏡室，并經(jīng)快速尿素酶實(shí)驗(yàn)、血HP抗體檢測來判定H.pylori的感染狀態(tài)。應(yīng)用特異性stem-loop引物完成逆轉(zhuǎn)錄，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)方法，對(duì)以上各組胃組織標(biāo)本中miRNA-100的表達(dá)水平進(jìn)行檢測。采用生物學(xué)方法預(yù)測miRNA-100的靶基因并鑒定。應(yīng)用SPSS20.0軟件對(duì)

4、本實(shí)驗(yàn)的所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)方法采用配對(duì)t檢驗(yàn)和非配對(duì)組間資料t檢驗(yàn)來判定其是否具有顯著性差異，以p<0．05作為判定標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果：(1) miRNA-100在胃癌組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯高于胃癌癌前病變的胃組織(P<0.05)，在胃癌組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯高于慢性淺表性胃炎胃黏膜組織(P<0.05)，在胃癌癌前病變的胃組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯高于慢性淺表性胃炎胃黏膜組織(P<0.05)。
　　(2)胃癌患者 miR

5、NA-100的表達(dá)量與患者的TNM分期呈正相關(guān)(P<0.05)，與其他各臨床病理參數(shù)（患者年齡、性別、腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等）無顯著相關(guān)性。
　　(3)30例胃癌組織中，miRNA-100在H.pylori感染的胃癌組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯高于非H.pylori感染的胃癌組織(P<0.05)。
　　(4)10例胃癌癌前病變胃組織中，miRNA-100在H.pylori感染的胃癌癌前病變胃組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯高

6、于非H.pylori感染的胃癌癌前病變胃組織(P<0.05)。
　　(5)30例慢性非萎縮性胃炎胃黏膜組織中，miRNA-100在 H.pylori感染和非H.pylori感染的慢性非萎縮性胃炎胃粘膜組織中的相對(duì)表達(dá)量高于非H.pylori感染的慢性非萎縮性胃炎胃粘膜組織，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　(6)生物信息學(xué)預(yù)測HS3ST2可能是miRNA-100的靶基因，雙熒光素酶檢測報(bào)告提示 miRNA-100可抑制

7、HS3ST2的表達(dá)，調(diào)控 HS3ST2在胃癌細(xì)胞 MGC-803內(nèi)的表達(dá)。
　　結(jié)論：(1)miRNA-100的表達(dá)上調(diào)與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，可能發(fā)揮著促癌基因的作用。胃癌患者 miRNA-100的表達(dá)量與患者的TNM分期呈正相關(guān)，與其他臨床病理特征無顯著相關(guān)性。
　　(2)H.pylori感染可能是引起 miRNA-100高表達(dá)的始動(dòng)因素，這可能是 H.pylori感染引發(fā)胃癌的分子機(jī)制之一。
　　(3)HS3ST2