虎杖提取物治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的初步成藥性研究.pdf

1、目的：通過對虎杖提取物治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的初步成藥性進(jìn)行研究，為虎杖治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用及研發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　方法：⑴虎杖提取物的制備及含量測定：虎杖藥材適當(dāng)粉碎后用95％乙醇回流提取2次，每次2 h，合并提取液，減壓回收乙醇至無醇味，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，減壓回收乙酸乙酯得二苯乙烯類提取物；水層酸水解后經(jīng)乙醚索氏提取至無色，乙醚層經(jīng)5%NaOH萃取，酸化后得到蒽醌類提取物；將二苯乙烯類與蒽醌類提取物混合得到虎杖提取物，采用HP

2、LC測定虎杖提取物中二苯乙烯類和蒽醌類的含量。⑵虎杖提取物理化性質(zhì)的測定：分別采用平衡法和搖瓶法測定虎杖提取物在不同pH磷酸鹽緩沖液中的表觀溶解度和表觀油水分配系數(shù)(LogP)。⑶虎杖提取物胃腸道穩(wěn)定性實驗：以虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素含量為指標(biāo)成分，考察虎杖提取物在人工胃液、人工腸液、人工胃液NE(無胃蛋白酶)、人工腸液NE(無胰蛋白酶)體外模擬胃腸道條件中的穩(wěn)定性。⑷虎杖提取物胃腸道吸收動力學(xué)實驗：采用大鼠在體胃吸收和在體單向腸灌流的

3、方法，以虎杖苷和白藜蘆醇作為指標(biāo)成分，研究其在大鼠的胃和小腸中的吸收特性。⑸虎杖提取物藥動學(xué)實驗：SD大鼠以2600 mg/kg劑量灌胃給予虎杖提取物后，分別于第5 min、10 min、15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h共12個時間點眼眶取血并處理血漿樣品。采用HPLC測定不同時間點虎杖苷和大黃素的血藥濃度，計算藥動學(xué)參數(shù)。⑹虎杖提取物治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎實驗：采用Coderre

4、造模方法制備痛風(fēng)急性關(guān)節(jié)炎模型。以大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹度、血漿中尿酸及黃嘌呤氧化酶為指標(biāo)，HE染色觀察踝關(guān)節(jié)滑膜病理組織學(xué)的改變，探討虎杖提取物對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的治療作用。
　　結(jié)果：①虎杖提取物的制備及含量測定：虎杖提取物得率為9.58%，經(jīng)HPLC檢測二苯乙烯類含量為24.22%，蒽醌類含量為38.01%。②理化性質(zhì)研究：虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素及虎杖提取物分別在pH為7.8、5.8、8.5、7.4時的表觀溶解度最大；虎杖提取物中虎杖

5、苷表觀油水分配系數(shù)LogP在0.83~0.91之間，大黃素表觀油水分配系數(shù)LogP在2.45~2.77之間。③胃腸道穩(wěn)定性研究：虎杖提取物中虎杖苷和白藜蘆醇在胃腸道中穩(wěn)定性較好，而大黃素在胃腸道中穩(wěn)定性較差，胃蛋白酶對以上三種成分影響較小，胰蛋白酶可能具有促進(jìn)大黃素分解的作用。④胃腸道吸收動力學(xué)研究：虎杖提取物中虎杖苷在胃內(nèi)吸收具有濃度飽和現(xiàn)象，可能是主動吸收或易化擴散機制；而白藜蘆醇在胃內(nèi)的吸收率隨著濃度的增加而增大，提示可能是被動吸

6、收機制；虎杖提取物不同濃度對虎杖苷和白藜蘆醇的腸吸收沒有影響，吸收無濃度飽和現(xiàn)象，提示其在腸道內(nèi)的吸收可能是被動擴散機制。⑤藥動學(xué)研究：虎杖提取物中虎杖苷、大黃素藥動學(xué)均屬于二房室模型，虎杖苷在大鼠體內(nèi)消除較快，分布廣泛，不易蓄積中毒；大黃素在大鼠體內(nèi)達(dá)峰時間快，分布較快，體內(nèi)消除較緩慢。⑥藥效學(xué)研究：虎杖提取物低、中、高劑量組可不同程度地減輕實驗大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹度(P＜0.05)，降低血尿酸(P＜0.05)和黃嘌呤氧化酶水平(P＜0.0