催產(chǎn)素系統(tǒng)在抑郁癥中的改變：與雄激素的關(guān)聯(lián).pdf

1、背景:
　　下丘腦室旁核(paraventricular nucleus，PVN)合成的催產(chǎn)素(oxytocin，OXT)兼具內(nèi)分泌激素和神經(jīng)遞質(zhì)/調(diào)質(zhì)功能。OXT被推測(cè)在親社會(huì)行為、抗應(yīng)激反應(yīng)等中樞調(diào)節(jié)中起重要作用，但是具體作用機(jī)制未明。抑郁癥患者外周血漿OXT水平變化方向的報(bào)道也存在矛盾。此外，在許多神經(jīng)精神疾?。òㄒ钟舭Y）中，研究者觀察到睪酮與OXT呈相反變化趨勢(shì)，而原因未明。OXT的效應(yīng)通過催產(chǎn)素受體(oxytocin

2、receptor,OXTR)而實(shí)現(xiàn)。迄今為止，OXT和OXTR是否及如何參與抑郁癥發(fā)病，雄激素能否直接調(diào)控OXT基因表達(dá)等科學(xué)問題仍未闡明。為了揭示OXT在抑郁癥患者腦內(nèi)發(fā)生的改變以及睪酮對(duì)OXT的可能調(diào)控機(jī)制，為深入研究OXT參與抑郁癥發(fā)病的作用機(jī)制以及性甾體對(duì)該過程的調(diào)控提供依據(jù)，我們?cè)谝钟舭Y患者下丘腦PVN中檢測(cè)OXT的表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)OXT表達(dá)神經(jīng)元是否表達(dá)雄激素受體（androgen receptor，AR）;繼而我們鑒定了人O

3、XT基因啟動(dòng)子區(qū)域的雄激素反應(yīng)單元（androgen response element,ARE），檢測(cè)雄激素調(diào)控人OXT基因表達(dá)的分子機(jī)制;我們還檢測(cè)了抑郁癥患者死亡后腦脊液內(nèi)睪酮水平變化以及抑郁癥患者前扣帶回(anterior cortex,ACC)和背外側(cè)前額葉（dorsolateral prefrontal cortex，DLPFC）內(nèi)OXTR mRNA和AR mRNA表達(dá)水平改變。ACC和DLPFC不僅是OXT的重要投射腦區(qū)，也

4、是參與情緒調(diào)控和抑郁癥發(fā)病的重要前額葉腦區(qū)。
　　方法:
　　(1)采用免疫細(xì)胞化學(xué)和圖像分析技術(shù)，研究抑郁癥患者下丘腦PVN內(nèi)OXT表達(dá)水平的變化;采用免疫細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)技術(shù)，研究人體下丘腦PVN內(nèi)OXT神經(jīng)元和AR是否存在共表達(dá)。
　　(2)采用免疫熒光染色技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)睪酮對(duì)入神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH內(nèi)源性O(shè)XT表達(dá)的影響;通過凝膠遷移實(shí)驗(yàn)和免疫共沉淀反應(yīng)，鑒定人OXT基因啟動(dòng)子區(qū)域是否存在具有

5、結(jié)合活性的ARE;通過構(gòu)建OXT啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)，檢測(cè)雄激素對(duì)人OXT基因表達(dá)的調(diào)節(jié)效應(yīng)。
　　(3)通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)死亡后抑郁癥患者和對(duì)照者腦脊液中睪酮水平的差異。
　　(4)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR，檢測(cè)抑郁癥患者ACC、DLPFC腦區(qū)內(nèi)OXTR mRNA和AR mRNA表達(dá)水平的變化，并對(duì)上述實(shí)驗(yàn)中的相關(guān)參數(shù)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　(1)與對(duì)照組相比，抑郁癥患者下丘腦PVN內(nèi)OXT神經(jīng)

6、元表達(dá)顯著增多(p=0.027);下丘腦PVN內(nèi)OXT神經(jīng)元存在與AR共表達(dá)，而且AR主要分布在OXT細(xì)胞核內(nèi)。
　　(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH能內(nèi)源性表達(dá)OXT和AR，采用雌激素受體拮抗劑和睪酮處理該細(xì)胞系，細(xì)胞內(nèi)源性O(shè)XT的表達(dá)顯著下降(p=0.05); OXT基因啟動(dòng)子區(qū)域存在ARE，睪酮能通過AR與ARE結(jié)合抑制OXT基因啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)活性(p=0.02)。
　　(3)與對(duì)照組相比，抑郁癥患

7、者腦脊液睪酮水平無顯著改變。女性抑郁癥患者(r=0.610，p=0.046)以及男、女性重性抑郁障礙（major depressive disorder, MDD）患者(r=0.550，p=0.042)腦脊液睪酮的水平與年齡成正相關(guān)，而男性抑郁癥患者以及男、女性雙相障礙(bipolar disorder，BD)患者中不存在這種相關(guān)性。
　　(4)抑郁癥患者ACC和DLPFC內(nèi)OXTR mRNA和AR mRNA的表達(dá)水平和對(duì)照組之間

8、無顯著差異。男性對(duì)照組ACC內(nèi)(r=0.703，p=0.034)和DLPFC內(nèi)(r=0.657，p=0.02)內(nèi)AR mRNA的表達(dá)水平與年齡存在顯著正相關(guān)，ACC內(nèi)還存在AR mRNA和OXTR mRNA表達(dá)的正相關(guān)(r=0.810，p=0.008);而男性對(duì)照組DLPFC內(nèi)這種相關(guān)性則缺失，女性對(duì)照組和男女性抑郁癥患者組內(nèi)AR mRNA和OXTR mRNA表達(dá)的顯著相關(guān)性缺失。然而，BD患者ACC內(nèi)AR mRNA和OXTR mRNA

9、存在顯著正相關(guān)(r=0.971，p=0.000)，而其DLPFC內(nèi)也觀察到AR mRNA和OXTRmRNA正相關(guān)趨勢(shì)(r=0.682，p=0.092)。最后，男性對(duì)照組DLPFC內(nèi)OXTRmRNA(p=0.007)和AR mRNA(p=0.032)的表達(dá)水平顯著低于女性，但是，由于女性組樣本量較?。行?9，女性=3），該結(jié)果還需擴(kuò)大樣本量而獲得確認(rèn)。
　　結(jié)論:
　　抑郁癥患者下丘腦PVN內(nèi)的OXT表達(dá)顯著上升。雄激素能通