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1、目的:通過(guò)比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸對(duì)失血性、溶血性“血虛”小鼠的補(bǔ)血作用,對(duì)急性“血瘀”大鼠、小鼠的活血作用,對(duì)抗正常大鼠“血栓”形成的作用,以及有效成分和雜質(zhì)含量的測(cè)定,為評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地當(dāng)歸的藥效和質(zhì)量提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:1.采用眼眶放血法建立失血性血虛小鼠模型,以外周血象RBC、HGB、HCT、WBC、PLT及LI、SI、TI的變化為觀察指標(biāo),比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸的補(bǔ)血作用。2.采用皮下注射乙酰苯肼法建立溶血性血虛小鼠模型,以
2、外周血象RBC、HGB、HCT、WBC、PLT,紅細(xì)胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及LI、SI、TI的變化為觀察指標(biāo),比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸的補(bǔ)血作用。3.采用皮下注射腎上腺素結(jié)合冰水浴法建立急性血瘀大鼠模型,以ηbh、ηbm、ηbl、ηp、EAI值變化為觀察指標(biāo),比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸的活血作用。4.采用腹腔注射腎上腺素建立急性血瘀小鼠模型,以耳廓?jiǎng)用}管徑、靜脈管徑和血流速度為觀察指標(biāo),比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸的
3、活血作用。5.腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠后建立頸動(dòng)-靜脈旁路,以血栓濕重、血栓干重為觀察指標(biāo),比較甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸的抗血栓形成作用。6.分別以2010年版中國(guó)藥典附錄Ⅹ A法、Ⅹ D項(xiàng)下甲法及Ⅵ D法測(cè)定當(dāng)歸浸出物、揮發(fā)油及阿魏酸含量;以95%乙醇去除雜質(zhì)后,以回流法提取當(dāng)歸多糖,以可見(jiàn)-紫外分光光度法測(cè)定其多糖含量。7.以2010年版中國(guó)藥典附錄Ⅸ K法測(cè)定當(dāng)歸總灰分及酸不溶性灰分含量;分別參照 GB/T5009.13-2003、GB/
4、T5009.13-2003、GB/T5009.17-2003及GB5009.12-2010測(cè)定銅、鉻、汞及鉛等元素含量。8.以2010年版中國(guó)藥典附錄Ⅸ Q項(xiàng)下方法測(cè)定六六六、滴滴涕、對(duì)硫磷、敵敵畏、氯氰菊酯及氰戊菊酯等農(nóng)藥含量。
結(jié)果:1.補(bǔ)血作用:對(duì)失血性血虛的影響,與模型組比較,岷縣、禮縣當(dāng)歸均能提高RBC、HGB、HCT、WBC(P<0.01),臨夏當(dāng)歸能提高RBC、HGB、HCT(P<0.01),渭源當(dāng)歸能提高WBC
5、(P<0.01),各當(dāng)歸有升高LI的趨勢(shì),岷縣當(dāng)歸能降低SI及提高TI(P<0.01及P<0.05),禮縣當(dāng)歸能提高TI(P<0.05),有降低SI趨勢(shì),渭源、臨夏當(dāng)歸能降低SI(P<0.01及P<0.05),有升高TI趨勢(shì);與陽(yáng)性組比較,岷縣當(dāng)歸能提高RBC、HGB、HCT、WBC(P<0.01);禮縣當(dāng)歸能提高WBC(P<0.01);臨夏當(dāng)歸能提高HGB(P<0.05)。與空白組比較岷縣、禮縣當(dāng)歸均能提高RBC、HGB、HCT、WB
6、C(P<0.01及P<0.05),臨夏當(dāng)歸能提高RBC、HGB、HCT(P<0.01及P<0.05)。對(duì)溶血性血虛的影響,與模型組比較,岷縣當(dāng)歸能提高RBC、HGB、HCT及降低WBC、PLT(P<0.01),臨夏當(dāng)歸能提高HGB、HCT及降低WBC、PLT(P<0.05及P<0.01),渭源當(dāng)歸能提高HGB、HCT及降低PLT(P<0.01),禮縣當(dāng)歸能降低PLT(P<0.01),岷縣當(dāng)歸能提高Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2
7、+-ATP酶活性(P<0.01及P<0.05),禮縣當(dāng)歸能提高Na+-K+-ATP酶活性( P<0.05),臨夏當(dāng)歸能提高Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(P<0.05),岷縣、渭源、臨夏及禮縣當(dāng)歸均能降低LI(P<0.01及P<0.05),有降低SI的趨勢(shì),岷縣、禮縣、渭源當(dāng)歸能升高TI(P<0.05)。
2.活血作用:對(duì)急性血瘀大鼠血液流變性的影響,與模型組比較,各當(dāng)歸有降低ηbh值的趨勢(shì),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;岷縣、禮縣當(dāng)歸能降
8、低ηbm、ηbl、ηp、EAI值(P<0.01及P<0.05);渭源當(dāng)歸能降低ηbl、EAI值(P<0.01及P<0.05),臨夏當(dāng)歸能降低ηbl、ηp值(P<0.05)。對(duì)急性血瘀小鼠耳廓微循環(huán)的影響,與模型組比較,各當(dāng)歸均可擴(kuò)張動(dòng)、靜脈管徑,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;均能提高血流速度,岷縣、臨夏當(dāng)歸作用顯著(P<0.05)。對(duì)正常大鼠血栓形成的影響,各當(dāng)歸組的血栓濕重、血栓干重均有上升趨勢(shì),岷縣當(dāng)歸組上升趨勢(shì)較為明顯。
3.甘肅岷縣、
9、禮縣、渭源、臨夏及云南各產(chǎn)地當(dāng)歸的浸出物含量為63.12、59.81、53.96、55.93、45.10%;揮發(fā)油含量為0.62、0.57、0.57、0.60、0.22%;阿魏酸含量為0.073、0.068、0.055、0.061、0.030%;多糖含量為12.75、17.15、15.05、12.30、6.45%。
4.甘肅岷縣、禮縣、渭源、臨夏及云南各產(chǎn)地當(dāng)歸的總灰分含量為4.66、15.54、6.30、5.81、4.74%
10、;酸不溶性灰分含量為1.00、3.29、1.42、1.89、0.98%;甘肅岷縣、禮縣、渭源及云南各產(chǎn)地當(dāng)歸的汞含量為0.012、0.014、0.013、0.015mg/kg;鉻含量為2.51、2.82、2.50、2.10mg/kg;銅含量為7.99、8.41、15.23、9.53mg/kg;鉛含量為0.65、0.84、0.79、1.05mg/kg;各產(chǎn)地的當(dāng)歸均未檢測(cè)出六六六、滴滴涕、對(duì)硫磷、敵敵畏、氯氰菊酯及氰戊菊酯等農(nóng)藥。
11、 結(jié)論:1.甘肅各產(chǎn)地當(dāng)歸(1.56 g/kg/d)較長(zhǎng)時(shí)間給藥(22d),具有改善失血性血虛小鼠外周血象,提高肝臟、胸腺指數(shù)并降低脾臟指數(shù)的作用,綜合比較岷縣當(dāng)歸作用較強(qiáng),且優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組。具有明顯改善乙酰苯肼溶血性血虛小鼠外周血象相關(guān)指標(biāo),提高紅細(xì)胞膜ATP活性,降低肝脾指數(shù),升高胸腺指數(shù)的作用,綜合比較岷縣當(dāng)歸作用較強(qiáng)。
2.甘肅各產(chǎn)地當(dāng)歸(1.08~1.56g/kg/d)較長(zhǎng)時(shí)間給藥(22d),對(duì)急性血瘀模型大鼠血液
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