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文檔簡介
1、目的:研究乙酰膽堿(ACh)調(diào)節(jié)大鼠臍靜脈張力變化的相關(guān)機制及鉀、鈣通道的參與。
方法:血管張力實驗檢測臍帶靜脈環(huán)對乙酰膽堿的收縮反應(yīng),孵育特異性阻斷劑闡明乙酰膽堿介導(dǎo)收縮可能的作用途徑。利用鈣成像技術(shù)檢測乙酰膽堿引起胞內(nèi)鈣濃度的變化。利用膜片鉗技術(shù)檢測急性分離臍帶靜脈平滑肌全細胞鉀電流,及乙酰膽堿對全細胞鉀電流的調(diào)節(jié)作用。用 RT-PCR的方法檢測毒蕈堿受體(M受體)各亞型mRNA相對于β-actin的表達量。
結(jié)
2、果:乙酰膽堿介導(dǎo)臍帶靜脈環(huán)濃度依賴性(10-12-10-4 mol/L)收縮,且被非選擇性毒蕈堿受體抑制劑阿托品完全阻斷,孵育特異性毒蕈堿受體抑制劑,結(jié)果顯示M1R,M3R而非M2R介導(dǎo)其收縮。鈣成像結(jié)果顯示乙酰膽堿引起胞內(nèi)鈣離子濃度升高,結(jié)合藥理學(xué)實驗表明內(nèi)鈣和外鈣同時參與調(diào)節(jié)乙酰膽堿的收縮作用。而鉀通道參與其收縮的負反饋調(diào)節(jié),同時膜片鉗結(jié)果顯示膽堿類藥物部分抑制全細胞鉀電流,從而通過調(diào)節(jié)膜電位的去極化介導(dǎo)收縮。RT-PCR表明大鼠臍
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