果蠅Dscam外顯子簇6互斥可變剪接中順式作用元件LCR的調(diào)控功能研究.pdf

1、可變剪接是產(chǎn)生蛋白質(zhì)多樣性的重要途徑，互斥可變剪接是可變剪接的重要形式之一?；コ饪勺兗艚邮侵冈趍RNA前體中有兩個或更多個可變外顯子連續(xù)排列在一起，但最終只有一個可變外顯子被剪接到成熟的mRNA中，而不會出現(xiàn)兩個或多個可變外顯子同時被剪接的情況?；コ饧艚幼钔怀龅睦邮呛诟构壧剖暇C合癥細胞粘附因子(Dscam)，它通過95個可變外顯子的互斥剪接可以產(chǎn)生38,016種不同的軸突導(dǎo)向受體。之前研究人員提出的錨定位點—選擇序列相互作用的假說能

2、很好的解釋Dscam外顯子簇6的互斥剪接機制并且該假說已經(jīng)得到本實驗室實驗證實，但是其啟動被選擇的可變外顯子的具體機制還不清楚。
　　 該研究通過比較基因組學(xué)、刪除突變實驗等方法在Dscam外顯子簇6錨定位點上游分析鑒定出一個對可變外顯子的剪接起重要作用的RNA結(jié)構(gòu)性順式作用元件——基因座控制區(qū)(LCR)。突變、互補突變等實驗證實該元件可以通過形成6個串聯(lián)的RNA二級結(jié)構(gòu)的形式起作用。
　　 之前的研究結(jié)果指出，hrp3

3、6是結(jié)合在外顯子簇6上的抑制蛋白。通過RNA干擾去除hrp36的抑制作用，會出現(xiàn)多個可變外顯子6剪接在一起的情況。但是我們的研究結(jié)果表明，即使是Δhrp36的可變外顯子仍需要LCR元件的存在才能被剪接。這說明LCR元件對可變外顯子的剪接是必需的。進一步研究表明，LCR元件是通過增強較弱剪接信號識別的方式啟動被選擇的可變外顯子。
　　 該研究闡釋了一種基因座控制區(qū)依賴性的互斥剪接機制，錨定位點—選擇序列形成的二級結(jié)構(gòu)與LCR元件共