探討重組人促紅細(xì)胞生成素改善血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能的可能機(jī)制.pdf

1、目的：
　　研究重組人促紅細(xì)胞生成素（rhEPO）改善血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能的可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　　將40只清潔級雄性SD大鼠，經(jīng)Morris水迷宮篩選合格后，隨機(jī)分為五組：假手術(shù)組、2VO組、2VO+rhEPO組、2VO+rhEPO+AG490（JAK2抑制劑）組、2VO+AG490組，每組8只。結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈（2VO）建立血管性癡呆模型。造模3天后，各組分別腹腔給予AG490（5mg/kg）或等劑量的

2、二甲基亞砜（DMSO，AG490的溶媒），30分鐘后鼻腔給予rhEPO（150U/125μ l）或等量的生理鹽水，每周給藥1次，共8次。8周后行Morris水迷宮試驗檢測各組大鼠的空間學(xué)習(xí)及記憶能力。HE染色觀察各組大鼠海馬 CA1區(qū)、皮層神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；電鏡觀察各組海馬神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：
　　1.行為學(xué)測試結(jié)果顯示：（1）定位航行實驗：逃避潛伏期越短，動物的學(xué)習(xí)能力越強(qiáng)；隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加，各組大鼠逃避潛伏期

3、明顯縮短。2VO+rhEPO組平均逃避潛伏期明顯低于2VO組、2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490組且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與假手術(shù)組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（2）空間探索實驗：穿越平臺次數(shù)越多，動物的記憶能力越強(qiáng)。1）2VO+rhEPO組穿越平臺次數(shù)明顯高于2VO組、2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P

4、＞0.05）。2）目標(biāo)象限停留時間：目標(biāo)象限停留時間越長，動物的記憶能力越強(qiáng)；結(jié)果顯示，5組大鼠在目標(biāo)象限停留的時間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。2.HE染色結(jié)果：①假手術(shù)組海馬 CA1區(qū)細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞形態(tài)正常，皮層可見大量錐體細(xì)胞，尼氏體豐富，胞核、軸突清晰可見；2VO組海馬CA1區(qū)細(xì)胞排列紊亂，可見胞體萎縮，核深染，核固縮，核溶解，皮層錐體細(xì)胞零星存在，軸突消失；2VO+rhEPO組:海馬 CA1區(qū)細(xì)胞排列相對整齊，細(xì)

5、胞結(jié)構(gòu)與正常細(xì)胞接近，偶見胞體縮小，皮層錐體細(xì)胞較多，軸突、胞核結(jié)構(gòu)尚清楚；2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490海馬CA1區(qū)及皮層神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變與2VO組類似。②電鏡結(jié)果顯示：假手術(shù)組細(xì)胞輪廓清晰，染色質(zhì)均勻分布；可見豐富的線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和游離核糖體以及高爾基復(fù)合體；2VO組細(xì)胞輪廓模糊，異染色質(zhì)呈現(xiàn)多發(fā)高密度塊狀分布；核周細(xì)胞器減少、崩解、消失；2VO+rhEPO組細(xì)胞輪廓尚清晰，核內(nèi)染色質(zhì)呈現(xiàn)不規(guī)則高密度點狀