南海鰻魚寄生異尖線蟲的分子鑒定.pdf

1、本研究根據(jù)形態(tài)學(xué)的觀察,從尖尾鰻(Uroconger lepturus),大眼擬?？导?Parabathymurusmacrophthalmus),綠尾草鰻(Chlopsis fierasfer),大眼油鰻(Myrophis macrophthalmus),尼氏突吻鰻(Rhynchocymba nystromi)等鰻魚檢測(cè)到的寄生線蟲中挑出幼蟲1068條(異尖屬線蟲除外)。應(yīng)用PCR-PFLP技術(shù)對(duì)其進(jìn)行鑒定。擴(kuò)增出核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄

2、間隔區(qū)(ITS)序列,對(duì)PCR產(chǎn)物分別用HinfI和RsaI內(nèi)切酶進(jìn)行酶切,經(jīng)電泳分析后區(qū)分出三種不同的帶型。選擇每個(gè)帶型的樣品3個(gè)進(jìn)行測(cè)序,將測(cè)得的序列與Genbank比對(duì),確定為三個(gè)種。通過系統(tǒng)進(jìn)化分析,發(fā)現(xiàn)Y1,Y3,Y5都聚類在宮脂屬這一分支,Y1與灰海鰻對(duì)盲囊線蟲Contracaecum muraenesoxi聚類在一起,Y5與帶魚針蛔線蟲Raphidascaris trichiuri聚類在一起,表明Y1是Contracaec

3、um muraenesoxi,Y5是Raphidascaris trichiuri,這與序列比對(duì)的結(jié)果相吻合,Y3處于宮脂屬中間,可以確定為宮脂屬的未定種。而Contracaecum muraenesoxi已被證實(shí)為廈門宮脂線蟲Hysterothylacium amoyense的同物異名,最終,確定三個(gè)種分別是廈門宮脂線蟲Hysterothylacium amoyense,宮脂線蟲未定種Hysterothylacium sp.NH-20

4、12和帶魚針蛔線蟲Raphidascaris trichiuri。經(jīng)統(tǒng)計(jì),在南海鰻魚的三種寄生線蟲中Hysterothylacium sp.NH-2012為優(yōu)勢(shì)種,其次為廈門宮脂線蟲Hysterothylacium amoyense和帶魚針蛔線蟲Raphidascaris trichiuri。其數(shù)量分布為,尖尾鰻(Uroconger lepturus)566/37/9,大眼擬?？导?Parabathymurusmacrophthalm

5、us)192/6/5,綠尾草鰻(Chlopsis fierasfer)100/12/0,大眼油鰻(Myrophismacrophthalmus)15/8/0,尼氏突吻鰻(Rhynchocymba nystromi)88/9/0,前肛鰻(Dysommaanguillaris)3/0/1,黑尾突吻鰻(Rhynchocymba ectenura)6/1/1,油鰻(Myrophis cheni)2/0/0,雜食豆齒鰻(Pisoodonophis

6、 boro)3/1/1,突吻鰻(Rhynchoconger ectenurus)2/0/0,褐每鰻(Muraenesox talabonoides)0/1/0。三個(gè)種的平均感染強(qiáng)度最高的是未定種(Hysterothylacium sp.),其中尖尾鰻(Uroconger lepturus)35,尼氏突吻鰻(Rhynehocymbanystromi)21,綠尾草鰻(Chlopsis fierasfer)25,大眼擬?？导?Parabat