寧波地區(qū)野生換錦花的遺傳多樣性及其生物堿加蘭他敏含量研究.pdf

1、換錦花（Lycoris sprengeri）為石蒜科（Amaryllidaceae）石蒜屬（Lycoris）植物，具有極好的觀賞價值和極高的藥用價值。為了保護野生植物資源，合理開發(fā)和利用寧波地區(qū)的野生換錦花，對換錦花種子的生物學特性和貯藏特性，6個地區(qū)野生換錦花鱗莖中主要成分的含量以及6個地區(qū)野生換錦花居群的遺傳多樣性水平和遺傳結(jié)構(gòu)進行了研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴以換錦花種子為實驗材料，觀察了種子的形態(tài)特征及測定了種子的千

2、粒重、含水量、種子生活力、發(fā)芽特性等種子的生物學特性，并對其種子貯藏的最佳條件進行了研究。結(jié)果表明：換錦花果實為蒴果，種子大小差異較大，種子長度為3.14mm～7.16mm；寬度為3.08mm～7.08mm；厚度為2.12mm～6.20mm。種子多數(shù)為桔瓣形，約占62％；少數(shù)為球形。鮮種子千粒重為180.1g，平均含水量為64.86%，平均生活力為83.33%。4℃濕沙、4℃和-80℃冰箱中貯藏都可以保持種子的生活力。⑵以采自舟山大貓島

3、及寧波市北侖洋漲岙、奉化蕭王廟、象山鶴浦、鎮(zhèn)海招寶山、慈溪海黃山等6個地區(qū)的野生換錦花鱗莖為實驗材料，以石蒜堿計總生物堿的含量，采用分光光度法測定其總黃酮、非淀粉粗多糖及總生物堿的含量；采用 HPLC法測定其加蘭他敏的含量。實驗結(jié)果表明，6個地區(qū)的野生換錦花鱗莖中主要成分的含量存在一定的差異。不同地區(qū)的野生換錦花鱗莖中的總黃酮、總生物堿、加蘭他敏的含量及非淀粉粗多糖的得率變化幅度分別為1.095mg·g-1～1.751 mg·g-1、2

4、.691 mg·g-1～5.559 mg·g-1、0.686mg·g-1～1.476 mg·g-1和11.590%～14.182%。其中采自象山鶴浦的總黃酮含量最高，為（1.751±0.116） mg·g-1；慈溪海黃山的非淀粉粗多糖的得率最高，為（14.182±0.523）%；鎮(zhèn)海招寶山的總生物堿的含量最高，為（5.559±0.394） mg·g-1；北侖洋漲岙的加蘭他敏的含量最高，為（1.476±0.018）mg·g-1。同一地區(qū)的

5、總生物堿與加蘭他敏的含量呈一定的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.601，但并不顯著。⑶采用ISSR分子標記技術(shù)，對寧波6個地區(qū)的野生換錦花居群的遺傳多樣性水平和遺傳結(jié)構(gòu)進行分析。10個ISSR引物共擴增出74個條帶，其中多態(tài)性條帶67個，多態(tài)性位點百分比（PPL）為90.54%。野生換錦花在物種水平上的遺傳多樣性很高，多態(tài)位點百分比（PPL）為90.54%，Nei’s基因多樣性（H）為0.2700，Shannon’s指數(shù)（I）為0.4144；在居

6、群水平上的遺傳多樣性較低，多態(tài)位點百分比（PPL）平均值為76.35%，Nei’s基因多樣性（H）平均值為0.2517，Shannon’s指數(shù)（I）平均值為0.3800。Nei’s基因分化系數(shù) Gst為0.0679，基因流 Nm為6.8654，AMOVA分子變異分析結(jié)果表明在總的遺傳變異中，有95.85%的變異發(fā)生在居群內(nèi)，僅有4.15%的變異發(fā)生在居群間，居群間較高的基因流水平可能是居群間遺傳分化程度很低的主要原因。UPGMA聚類結(jié)果