腦心通-PPARα信號抑制H2O2介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡、自噬.pdf

1、腦心通是一個基于中醫(yī)原則的復(fù)方制劑，已通過中國食品和藥物管理局(CFDA)認(rèn)證，在中國廣泛用于治療患者的腦血管和心血管疾病。但腦心通對活性氧(ROS)誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)機(jī)制仍不清楚。我們發(fā)現(xiàn)腦心通水提取物(WNXT)能夠顯著增加H2O2誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞損傷的存活率，并且減少細(xì)胞凋亡數(shù)量。腦心通水提取物通過增加PPARα蛋白表達(dá)水平，從而上調(diào)MCL-1抗凋亡蛋白表達(dá)水平并抑制Bax和Bad促凋亡蛋白表達(dá)，最后抑制caspase-

2、3和PARP-1凋亡信號的激活。由于壞死、凋亡和自噬是細(xì)胞死亡的三大主要方式，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)WNXT/PPARα信號抑制H2O2誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞自噬。取得顯著性研究結(jié)果如下：
　　1、利用MTT法檢測發(fā)現(xiàn)腦心通水提物能夠顯著提高H9c2心肌細(xì)胞存活率，有抑制心肌細(xì)胞凋亡作用。
　　2、腦心通水提取物進(jìn)行了質(zhì)譜分析、鑒定，發(fā)現(xiàn)有70多種藥物活性成分，主要包括芍藥苷(80.4％)、丹酚酸B(10.1%)、沒食子酸(4.6%)、

3、綠原酸(1.8%)、阿魏酸(1.5%)等12種藥效成分。
　　3、通過蛋白免疫印跡、TUNEL染色、流式、免疫熒光染色等方法證明了腦心通水提物抑制H2O2介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。腦心通水提物顯著抑制凋亡下游信號(caspase-3和PARP-1)激活，心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯減少。
　　4、研究發(fā)現(xiàn)PPARα基因沉默降低抗凋亡蛋白MCL-1表達(dá)量，并且使促凋亡蛋白Bax，Bad表達(dá)量升高，進(jìn)而激活凋亡下游信號，明顯增加心肌細(xì)胞凋亡數(shù)