2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:通過(guò)制作新生大鼠缺氧缺血性腦損傷模型,檢測(cè)腦損傷后大鼠松果體中microRNA的表達(dá)譜變化;并進(jìn)行松果體細(xì)胞培養(yǎng),建立細(xì)胞缺氧缺糖模型,用miR-375慢病毒載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞,檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率及松果體功能的變化,探討miR-375在缺氧缺糖中對(duì)松果體功能的影響。
  方法:采用7日齡SD新生大鼠,根據(jù)改良Rice-Vannucci法建立HIBD模型。將新生大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組)、缺氧缺血組(HIBD組),采用基因芯片及R

2、T-qPCR法檢測(cè)HIBD后24h大鼠松果體中microRNA表達(dá)譜的變化;采用新生24h以內(nèi)的SD大鼠進(jìn)行松果體培養(yǎng),行氧糖剝奪(oxygen glucose deprivation,OGD)的處理方法,模擬缺氧缺血模型。選取氧糖剝奪后0h、12h、24h、48h、72h、96h六個(gè)時(shí)間點(diǎn),RT-qPCR測(cè)定氧糖剝奪前后AANAT mRNA及miR-375表達(dá)的變化;ELISA法檢測(cè)褪黑素(MT)水平的變化;用CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活性。

3、采用miR-375慢病毒載體轉(zhuǎn)染后,行上述實(shí)驗(yàn),初步探討松果體中microRNA在缺氧缺血性腦損傷中的可能機(jī)制。
  結(jié)果:
  1、芯片及RT-qPCR結(jié)果顯示,新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后松果體中microRNA表達(dá)譜發(fā)生變化。
  2、RT-qPCR結(jié)果顯示,缺氧缺糖后miR-375表達(dá)上調(diào),24h達(dá)到高峰后下降,72h趨向0h水平;AANAT表達(dá)下調(diào),12h左右達(dá)最低點(diǎn),72h趨向0h水平;miR-375慢病毒轉(zhuǎn)

4、染細(xì)胞后miR-375表達(dá)明顯上調(diào),72h趨于穩(wěn)定;AANAT表達(dá)下調(diào),48h趨于穩(wěn)定;miR-375慢病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后行缺氧缺糖實(shí)驗(yàn),miR-375表達(dá)上調(diào),24h達(dá)到高峰;AANAT表達(dá)下調(diào),24h左右達(dá)最低點(diǎn)。
  3、ELISA結(jié)果發(fā)現(xiàn),缺氧缺糖后MT分泌水平下降,24h左右達(dá)最低點(diǎn),96h左右恢復(fù)缺氧缺糖0h水平;miR-375慢病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后MT分泌水平下降,72h趨于穩(wěn)定;miR-375慢病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后行缺氧缺糖實(shí)驗(yàn),

5、MT分泌水平下降,24h及48h之間達(dá)最低點(diǎn)。
  4、CCK8結(jié)果顯示,缺氧缺糖0.5h、1h后,細(xì)胞增長(zhǎng)活力無(wú)明顯變化,缺氧缺糖2h后,可使松果體細(xì)胞獲得適度損傷,缺氧缺糖3h后,細(xì)胞活力明顯下降。
  結(jié)論:
  1.新生大鼠HIBD后松果體microRNA表達(dá)譜發(fā)生改變,其中miR-375明顯上調(diào)。
  2.松果體細(xì)胞缺氧缺糖后miR-375、AANAT表達(dá),分泌MT水平均發(fā)生變化。
  3.松果體

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