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1、研究背景:缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)存活者可表現(xiàn)出精神運(yùn)動(dòng)發(fā)育、睡眠覺醒周期、激素分泌等多方面晝夜節(jié)律紊亂的現(xiàn)象。晝夜節(jié)律(circadian rhythms)是生物體對(duì)周期性出現(xiàn)的生存環(huán)境所做出的適應(yīng)性反應(yīng),機(jī)體的許多生理活動(dòng)都受到它的調(diào)節(jié),許多疾病的發(fā)生、發(fā)展都與晝夜節(jié)律異常有關(guān)。相對(duì)于視交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)的中樞性起搏調(diào)控作
2、用,松果體作為一個(gè)神經(jīng)內(nèi)分泌器官,既有中樞晝夜節(jié)律振蕩器的作用,又能合成褪黑素(melatonin,MLT)而發(fā)揮內(nèi)分泌輸出效應(yīng)。在分子水平上,細(xì)胞內(nèi)存在的節(jié)律振蕩器是由多個(gè)鐘基因(clock genes)蛋白組成的正負(fù)反饋轉(zhuǎn)錄一翻譯調(diào)控環(huán)路,其中兩個(gè)非常重要的成分就是Clock mRNA和Per mRNA。目前國(guó)內(nèi)外尚未見到從鐘基因方面對(duì)HIBD損傷中晝夜節(jié)律異?,F(xiàn)象進(jìn)行研究的相關(guān)報(bào)道。 目的:比較HIBD模型組與對(duì)照組的新生
3、大鼠松果體中Clock mRNA和Per2 mRNA以及CLOCK蛋白表達(dá)與血漿MLT濃度的變化,探討鐘基因表達(dá)異常在缺氧缺血性腦損傷導(dǎo)致的晝夜節(jié)律紊亂中可能扮演的重要角色。 方法:用7日齡新生SD大鼠,隨機(jī)分為兩組(HIBD組36只,對(duì)照組36只)。HIBD模型按改良Levine法建立。用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、westernblot和放射性免疫分析法(RIA)分別測(cè)定缺氧缺血后0、2、12、24、36、48
4、小時(shí)松果體中Clock mRNA和Per2 mRNA以及CLOCK蛋白的表達(dá)量和血漿MLT濃度,并比較各組之間的差異。 結(jié)果:1.HIBD后各時(shí)間點(diǎn)Clock mRNA的表達(dá)水平與相應(yīng)對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;HIBD組和對(duì)照組內(nèi)部各時(shí)間點(diǎn)之間Clock mRNA的表達(dá)差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);2.對(duì)照組的Per2 mRNA表達(dá)無明顯節(jié)律性,但在HIBD后24小時(shí),Per2 mRNA表達(dá)開始下調(diào),在36小時(shí)和48小時(shí)顯著
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