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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本課題通過(guò)建立動(dòng)物模型,檢測(cè)對(duì)比正常健康豚鼠、HSV-2感染模型豚鼠和HSV-2感染模型治療組各細(xì)胞因子的血清含量測(cè)定、蛋白測(cè)定及基因表達(dá)情況,分析細(xì)胞因子在生殖器皰疹發(fā)病過(guò)程中的作用。并進(jìn)行了病毒滴度的分析、組織病理及外陰皮膚上皮細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)的觀察等研究,探討參芪止皰顆粒豚鼠體內(nèi)對(duì)HSV-2的抑制作用機(jī)制,為中醫(yī)藥臨床實(shí)踐提供可靠的客觀依據(jù),同時(shí)為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)開發(fā)利用中醫(yī)藥提供科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:本研究以Dunk
2、in Hartly白化雌性豚鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,建立HSV-2感染豚鼠生殖道模型,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、參芪止皰顆粒組和阿昔洛韋(ACV)組,各組給予相應(yīng)藥物治療(模型組、正常對(duì)照組給予生理鹽水)。利用顯微鏡觀察對(duì)比各組豚鼠外陰皮膚癥狀,細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定豚鼠陰道組織內(nèi)病毒滴度,HE染色制作子宮、輸卵管、卵巢組織病理切片、電鏡觀察并記錄病理結(jié)果及外陰皮膚組織上皮細(xì)胞及脊髓神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)的變化。用RT-PCR法測(cè)定各組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-
3、2、IL-6、IFN-γ、TNF-α、NF-κB mRNA表達(dá)情況。用ELISA法檢測(cè)血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α因子含量,用蛋白印跡法檢測(cè)豚鼠子宮NF-κB蛋白表達(dá)。以上各組數(shù)據(jù)均進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
結(jié)果:治療結(jié)束時(shí),將各組豚鼠陰道內(nèi)病毒滴度,外陰皮膚癥狀評(píng)分,子宮、輸卵管、卵巢組織病理及外陰皮膚上皮細(xì)胞和脊髓神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行對(duì)比,參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),各治療組與
4、模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,參芪止皰顆粒組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-2、IFN-γmRNA表達(dá)上調(diào),IL-6和TNF-α、NF-κBmRNA表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);血清中IL-2、IFN-γ含量高,IL-6和TNF-α含量低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);豚鼠子宮NF-kB蛋白表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
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