載5-氟尿嘧啶納米藥物和順鉑的殼聚糖溫敏凝膠體系對(duì)結(jié)直腸癌腹膜擴(kuò)散的治療研究.pdf

1、目的：制備負(fù)載5-氟尿嘧啶（5-FU）的納米藥物及構(gòu)建載5-氟尿嘧啶納米藥物和順鉑的殼聚糖溫敏凝膠體系，評(píng)價(jià)該體系對(duì)結(jié)直腸癌腹膜擴(kuò)散的治療作用。
　　方法：本文采用分子量為2000的聚乙二醇（PEG）為大分子引發(fā)劑,引發(fā)ε-己內(nèi)酯開環(huán)聚合,通過催化劑辛酸亞錫（Sn(Oct)2）催化合成了分子量為3700的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯（PCL-PEG-PCL，PCEC）三嵌段共聚物，然后以 PCEC聚合物為載體，通過自組裝包載5-氟

2、尿嘧啶形成聚合物膠束（5-FU膠束）。再采用殼聚糖溫敏性水凝膠、順鉑和5-FU膠束制備成傳輸雙重藥物并具有緩釋特性的抗腫瘤藥物制劑。通過動(dòng)態(tài)光散射法和透射電鏡分別表征5-FU膠束的粒徑與形貌，通過高效液相色譜儀測定5-FU膠束的載藥率與包封率，以及通過改良透析法研究5-FU膠束、殼聚糖凝膠藥物體系的體外藥物釋放，噻唑藍(lán)（MTT）試驗(yàn)測定5-FU膠束與空白PCEC聚合物的體外細(xì)胞毒性，通過流變儀對(duì)該殼聚糖凝膠藥物體系的流變學(xué)特性進(jìn)行研究。

3、運(yùn)用BALB/c小鼠建立結(jié)直腸癌腹膜擴(kuò)散（CRPC）模型，隨機(jī)分為6組（各組分別為12只,6只觀察腹腔腫瘤結(jié)節(jié)重量和數(shù)量，6只觀察生存期）：(1)生理鹽水組(NS組)，(2)空白膠束-凝膠組，(3)5-FU膠束(20 mg/Kg)，(4)載順鉑的殼聚糖凝膠（1mg/kg），（5）氟尿嘧啶注射液（20mg/kg）+順鉑注射液（1mg/kg），（6）殼聚糖凝膠藥物體系(又名雙重藥物緩釋制劑組)。接著，腹腔注射200ul上述提及的藥物，觀察荷

4、瘤小鼠的生存期評(píng)估雙重藥物緩釋制劑的體內(nèi)抗腫瘤療效。在第21天處死小鼠，因21天后生理鹽水組和空白膠束-凝膠組小鼠開始死亡。測定腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)量和重量。此外，收集肝肺組織做H&E染色，以此評(píng)估腫瘤轉(zhuǎn)移情況。通過免疫組化法測定Ki-67初步探究抗腫瘤可能的機(jī)制。
　　結(jié)果：該研究制備的5-FU膠束具有較高的包封率，呈球形的，平均粒徑為22.56 nm，單分散的，有非常窄的粒徑分布，且隨著載藥量增加，平均粒徑改變也不大。在體外釋放研究結(jié)果

5、中表明，5-FU膠束、殼聚糖凝膠藥物體系中5-FU和順鉑都能從該凝膠載藥體系中釋放出來，無明顯的突發(fā)釋放，呈現(xiàn)出緩慢的藥物釋放行為。MTT結(jié)果顯示5-FU膠束的細(xì)胞毒性明顯高于游離5-FU，且空白PCEC聚合物的毒性相對(duì)較低，是一種理想的安全的藥物傳遞系統(tǒng)。殼聚糖凝膠藥物體系和空白殼聚糖凝膠同樣具有良好的溫敏特性。體內(nèi)研究結(jié)果表明，與NS組（53.83±9.99,2.31±0.38 g, P＜0.001）、空白膠束-凝膠組（52.67±

6、6.12,2.26±0.28 g, P＜0.001）、5-FU膠束(22.5±4.23,0.99±0.17 g, P＜0.001)、載順鉑的殼聚糖凝膠（23.33±3.56,0.98±0.13 g, P＜0.001）、氟尿嘧啶注射液+順鉑注射液（18.16±3.06,0.79±0.13 g, P＜0.05）相比，殼聚糖凝膠藥物體系的腫瘤結(jié)節(jié)的數(shù)量和重量(10.33±2.66,0.49±0.11 g)顯著減少，明顯抑制了腫瘤的生長，且空白

7、膠束-凝膠組則沒顯示出任何的抗腫瘤作用。殼聚糖凝膠藥物體系組的中位生存期為43天，與NS組（25天）、空白膠束-凝膠組（26天）、5-FU膠束（31天）、載順鉑的殼聚糖凝膠組（33天）、氟尿嘧啶注射液+順鉑注射液組（35天）相比是明顯延長的。此外，觀察結(jié)直腸癌腹膜擴(kuò)散小鼠的肝肺轉(zhuǎn)移情況，通過肝肺組織的 H&E染色結(jié)果表明，殼聚糖凝膠藥物體系可以在一定程度上抑制結(jié)直腸癌腹膜擴(kuò)散后繼續(xù)向肝肺組織的轉(zhuǎn)移。殼聚糖凝膠藥物體系Ki-67陽性表達(dá)細(xì)

8、胞數(shù)（21.83±5.71％）的比例明顯低于NS組（83.67±4.89%, P＜0.001）、空白膠束-凝膠組（80.67±3.78%, P＜0.001）、5-FU膠束（57.00±5.66%, P＜0.001）、載順鉑的殼聚糖凝膠組（55.50±4.64%, P＜0.001）、氟尿嘧啶注射液+順鉑注射液組（39.50±3.94%, P＜0.001），且都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：PCEC聚合物聯(lián)合單純的殼聚糖水凝膠組成的雙重