高頻微秒電脈沖用于腫瘤消融的研究.pdf

1、癌是指起源于上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，是人類健康的三大殺手之一。目前臨床對(duì)于癌癥的治療方法主要有傳統(tǒng)的手術(shù)切除，放射治療和化學(xué)治療，然而這些方法給患者的身體和精神都帶來很大傷害；新型微創(chuàng)手法如射頻消融、微波消融、冷凍消融和聚焦超聲消融等又由于其熱沉效應(yīng)，在腫瘤消融時(shí)會(huì)對(duì)周圍組織或臟器造成傷害而存在局限性；不可逆電穿孔（IRE，Irreversible electroporation）是一種非熱效應(yīng)的腫瘤消融方式，可以對(duì)膽管及血管周圍的腫瘤進(jìn)行

2、消融，在臨床受到越來越多的關(guān)注。
　　本研究在傳統(tǒng)不可逆電穿孔的基礎(chǔ)上將電脈沖加以改進(jìn)，運(yùn)用頻率增大的高頻脈沖，與正負(fù)極交替的雙極性脈沖，理論上可以改善傳統(tǒng)不可逆電穿孔脈沖在臨床治療時(shí)存在的問題。實(shí)驗(yàn)從生物角度出發(fā)，分別在細(xì)胞、組織與動(dòng)物實(shí)體瘤的水平探究了高頻單極性脈沖與高頻雙極性脈沖運(yùn)用于腫瘤消融的殺傷效果，研究結(jié)果可以促進(jìn)兩種新型脈沖的臨床應(yīng)用。對(duì)于高頻單極性脈沖，用MTT檢測電脈沖刺激后的正常表皮細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞，通過相對(duì)

3、活細(xì)胞量判斷不同頻率脈沖的殺傷效果；用Annexin V-FITC/PI染色的流式細(xì)胞術(shù)檢測電刺激后的細(xì)胞，探究不同頻率及不同電場強(qiáng)度電脈沖作用下的細(xì)胞死亡途徑；用細(xì)胞膜熒光探針DiI染色，觀察脈沖作用下的細(xì)胞膜穿孔情況。對(duì)于高頻雙極性脈沖，用CCK-8檢測電脈沖刺激后的細(xì)胞，判斷不同頻率及不同占空比脈沖的殺傷效果；用Annexin V-FITC/PI染色的流式細(xì)胞術(shù)檢測電刺激后的細(xì)胞，探究不同頻率及不同電場強(qiáng)度電脈沖作用下的細(xì)胞死亡途

4、徑；對(duì)家兔的肝施加電刺激，用石蠟切片與H&E染色法觀測不同頻率的脈沖在組織的電場分布。建立裸鼠荷瘤模型，用傳統(tǒng)IRE脈沖及兩種高頻脈沖刺激腫瘤，H&E染色及測量確定腫瘤消融情況。結(jié)果表明：總能量相同的前提下，高頻脈沖的殺傷效果隨脈沖寬度的增大而增大，隨電場強(qiáng)度的增大而增大，與占空比的大小沒有關(guān)系；高頻單極性微秒脈沖與高頻雙極性微秒脈沖可以達(dá)到與傳統(tǒng)脈沖相同的殺傷效果，傳統(tǒng)不可逆電穿孔脈沖（IRE）與高頻單極性微秒脈沖作主要使細(xì)胞發(fā)生壞死