PEI衍生物的設計、合成及其轉(zhuǎn)染性能的研究.pdf

1、陽離子聚合物聚乙烯亞胺（PEI）被認為是基因轉(zhuǎn)染效率最高的聚合物之一，但當它轉(zhuǎn)染效率高時，其分子量較大，細胞毒性也大，而小分子量時其細胞毒性小，但轉(zhuǎn)染效率低。因此設計在聚乙烯亞胺（PEI）中引入疏水組分、PH-敏感組分和可降解組分，探討各種修飾組分增加其轉(zhuǎn)染效率和降低其細胞毒性的規(guī)律具有重要的理論意義和潛在的應用價值。 首先，我們合成了不同疏水碳鏈長度的N-烷基丙烯酰亞胺和不同連接臂長度的N-烷基酰胺酸的琥珀酰亞胺活化酯（NHS

2、活化酯），使它們與PEI2700和bPEI25KDa反應，制得相應的PEI衍生物，探索疏水脂肪基對聚合物載體轉(zhuǎn)染能力的影響。其次，合成了各種酸酐修飾的PEI衍生物，研究了PEI側(cè)鏈上偶聯(lián)羧基的密度對PH-敏感性及其基因轉(zhuǎn)染性能的影響。最后，合成了三種二縮水甘油酯交聯(lián)劑（環(huán)氧酯型），與低分子量的PEI交聯(lián)，制備可降解的PEI衍生物，探索引入羥基和可降解組分對聚合物載體的水溶性和細胞毒性的影響。 通過初步評價，篩選出偶聯(lián)羧酸官能團的

3、PEI衍生物（P36）和丁二酸二縮水甘油酯交聯(lián)的PEI（P54）具有較高的轉(zhuǎn)染效率，然后，這兩種聚合物、bPEI25KDa和商品化的試劑Fugen6以293細胞、B16F10細胞、A549細胞和HepG2細胞為受體細胞，增強綠色熒光蛋白質(zhì)粒（EGFP）為報告基因進行了細胞轉(zhuǎn)染實驗。結(jié)果表明，P36、P54的轉(zhuǎn)染效率高于bPEI25KDa，與Fugen6相當。這兩種聚合物與DNA形成的復合物的粒徑在100nm～200nm之間，且與bPEI