催化共振散射光譜法測(cè)定α-淀粉酶、過(guò)氧化氫和葡萄糖.pdf

1、第一部分：緒論 介紹了共振散射技術(shù)理論。綜述了近年來(lái)共振散射技術(shù)在分析化學(xué)中的應(yīng)用，介紹了α-淀粉酶、過(guò)氧化氫和葡萄糖的分析進(jìn)展。 第二部分：可溶性淀粉的共振散射光譜研究及其在α-淀粉酶活力測(cè)定中的應(yīng)用在0.8mg/ml聚丙烯酰胺(PAM)存在條件下，可獲得較穩(wěn)定的平均粒徑為317nm的淀粉微粒。它在423nm處有一較強(qiáng)的共振散射峰。在50℃，pH為5.3的磷酸鹽緩沖溶液中，淀粉微粒被α-淀粉酶(α-amylase,AM

2、S)催化水解成小分子，導(dǎo)致423nm處共振散射峰強(qiáng)度降低。在選定條件下，AMS酶活力濃度在0.00835～0.501μg/ml(或0.00138-0.0827U/ml)范圍內(nèi)與共振散射強(qiáng)度降低值△I呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為△I=155C+13，相關(guān)系數(shù)R=0.9857。本法應(yīng)用于人體唾液α-淀粉酶活力測(cè)定，結(jié)果滿意。 第三部分：HRP酶催化-陽(yáng)離子表面活性劑締合微粒共振散射光譜法測(cè)定痕量過(guò)氧化氫在醋酸緩沖溶液中，辣根

3、過(guò)氧化物酶(HRP)可以催化H2O2與過(guò)量的I-反應(yīng)生成I3-，I3-分別與陽(yáng)離子表面活性劑TDMBA、DDAC、CTAB、ODC、CPCM、DPC和TBAB等形成締合物微粒TDMBA-I3、DDAC-I3、CTAB-I3、ODC-I3、CPCM-I3、DPC-I3和TBAB-I3，該締合物微粒均在460nm處有一個(gè)共振散射峰。過(guò)氧化氫的濃度在0.17～172.8、0.432～172.8、1.728～259.2、1.728～86.4、1

4、.728～216、0.864～259.2和0.864～86.4×10-7mol/L范圍內(nèi)分別與各體系在460nm處的共振光譜強(qiáng)度呈線性關(guān)系。其檢出限分別為0.086、0.34、1.72、0.46、0.36、0.64和0.44×10-7mol/L。本法應(yīng)用于過(guò)氧化氫測(cè)定，結(jié)果滿意。 第四部分：雙酶催化-陽(yáng)離子表面活性劑締合微粒共振散射光譜法測(cè)定痕量葡萄糖在醋酸緩沖溶液中，葡萄糖(G)在葡萄糖氧化酶(GOD)的作用下生成葡糖糖酸和H

5、2O2，HRP可以催化H2O2與過(guò)量的I-反應(yīng)生成I3-，I3-分別與陽(yáng)離子表面活性劑十四烷基芐基二甲基氯化銨(TDMBA)、氯代十六烷基吡啶(CPCM)和十二烷基芐基二甲基氯化銨(DDAC)形成締合物微粒TDMBA-I3、CPCM-I3和DDAC-I3，該締合物微粒分別在460nm、540nm和430nm處有一個(gè)共振散射峰。對(duì)于TDMBA、CPCM和DDAC體系，葡萄糖的濃度分別在0.2～20×10-7mol/L、0.2～60×10-