環(huán)境激素鄰苯二甲酸二環(huán)己酯和鄰苯二甲酸二丁酯熒光免疫分析新方法研究.pdf

1、環(huán)境激素類鄰苯二甲酸酯是一類重要的環(huán)境激素物質(zhì)。它干擾生物為保持體內(nèi)平衡并調(diào)節(jié)生長過程的正常激素的產(chǎn)生、釋放、轉(zhuǎn)移、代謝、反應和消除，或在未受損的生物后代中引起不良的健康影響和內(nèi)分泌功能的改變。近年來，隨著工業(yè)生產(chǎn)和塑料制品的使用，塑料垃圾的大量增加，鄰苯二甲酸酯不斷進入環(huán)境，已成為全球性最普遍的污染物之一，廣泛存在于大氣、水體、土壤、生物體等自然環(huán)境中。 目前文獻報道對鄰苯二甲酸酯監(jiān)測的方法主要是GC、HPLC和GC/MS。但

2、是這些分析方法將待測污染物從樣品中分離提取并去除雜質(zhì)干擾的前處理過程十分復雜，操作費時，分析成本昂貴。因此，有必要開發(fā)一種簡單、快捷且經(jīng)濟的檢測技術。免疫分析技術以其快速、靈敏度高、經(jīng)濟、樣品所需量少等優(yōu)點而成為21世紀最具競爭性和挑戰(zhàn)性的監(jiān)測分析技術。目前，免疫分析技術應用于小分子物質(zhì)的監(jiān)測日益受到重視，已經(jīng)成為監(jiān)測分析環(huán)境中痕量污染物研究的熱點。 經(jīng)文獻調(diào)研發(fā)現(xiàn)，用免疫分析方法測定環(huán)境激素物質(zhì)的報道很少。這表明免疫分析技術用

3、于分析環(huán)境激素物質(zhì)有很大的發(fā)展前景，有待進一步研究。為此，本文研究的目標是建立測定環(huán)境激素類鄰苯二甲酸酯的免疫分析新方法。圍繞這一目標，主要進行了以下幾個力面的研究工作： 一．用本課題組提供的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯全抗原和鄰苯二甲酸二丁酯全抗原免疫兔子，從兔子血清中獲得了鄰苯二甲酸二環(huán)己酯和鄰苯二甲酸二丁酯抗體。并對制備的這兩種抗體進行了純化。二．用制備的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯抗體包被酶標板，以酶聯(lián)免疫雙抗夾心法為基礎，以異硫氰酸熒光素

4、為熒光探針，研究了雙抗夾心免疫反應的條件，建立了鄰苯二甲酸二環(huán)己酯抗體包被熒光免疫分析新方法和競爭熒光免疫分析新方法。該方法靈敏度高，選擇性好,線性范圍寬，用該方法測定自來水和飲用水中的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯，結(jié)果令人滿意。 三．用制備的鄰苯二甲酸二丁酯抗原和抗體分別包被酶標板，以酶聯(lián)免疫雙抗夾心法為基礎，以異硫氰酸熒光素為熒光探針，研究了雙抗夾心免疫反應的條件，建立了鄰苯二甲酸二丁酯抗原包被和抗體包被熒光免疫分析新方法。該方法靈敏