黃皮clausenalansiumlour.種質(zhì)資源的issr分析

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文黃皮（Clausena lansium Lour.）種質(zhì)資源的ISSR分析姓名：李開(kāi)拓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：果樹(shù)學(xué)指導(dǎo)教師：潘東明20080401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 A B S T R A C TI S S R a n a l y s i so f g e r m p l a s m r e s o u r c e s o f W a m p e eA b s t r a c tV C a m p e e

2、 ( C l a u s e n a l a n s i u m L o u r ．S k e e l s ) b e l o n g st oR u t a c e a s e ，c o n s i s t so f a b o u t30s p e c i e sa l lo v e rt h ew o r l d ．I ti s o n eo ft h em o s tw e l l ·k n o w n s p e c

3、 i a l f r u i tt r e ei ns o u t hc h i n a ，w h e r e i s t h en a t i v e l a n d o fW a m p e e ，t h e r ea r e 11 s p e c i e s ，m a i n l yd i s t r i b u t i n gi nF u j i a n ，G u a n g d o n g ，G u a n g x i ，a

4、n d H a i n a n ．W a m p e e h a sb e e nc u l t i v a t e di n c h i n a f o r15 0 0 y e a r so l d ．G u a n g d o n ga n d G u a n g x ih a v ec a r r i e ds o m e b a s i c s t u d i e sa c c o r d i n g l y ，i n c l

5、u d i n gc u l t i v a t i o n ，m a n a g e m e n t ，m o r p h o l o g i c a l l y ，p h y s i o l o g i c a l l ya n d S Oo n ，s e l d o mf r o mt h e a n g l e o f m o l e c u l a r b i o l o g y ．T h er e s e a r c h o

6、 nb o t hg e n e t i cd i v e r s i t y i n v e s t i g a t i o na n d i d i o p l a s m e v a l u a t i o ns y s t e m a t i c a l l y a r e s t i l la b s e n t ．I Ⅱt h i ss t u d y ，i n t e r - s i m p l es e q u e n

7、c er e p e a t ( I S S R ) m e t h o dw a s a p p l i e d t od e t e c tg e n e t i cv a r i a t i o no fc u l t i v a t e dW a m p e ef r o m4 0s a m p l e s ．T h er e s u l t sc o u l dp r o v i d es c i e n t i f i cb

8、 a s i sf o rm a k i n gr i g h tp r o t e c t i o ns t r a t e g ya n d h e l pt of o s t e rn e w c u l t i v a r s ．T h e m a i nr e s u l t sw e r e a sf o l l o w ：1 ．F a c e dt h e f a c tt h a ti t i sd i f f i c

9、u l t yt oe x t r a c tD N A f r o m W a m p e e w h i c h c o n t a i n sp h e n o l i c c o m p o u n da n dq u i t eal o t o f s u g a r ，t h er e s e a r c h e r u s e di m p r o v e d S D Sm e t h o d t oe x t r a c

10、 tD N A o fW a m p e e ，w h i c h m e e t sI S S R r e q u i r e m e n t si nq u a n t i t ya n dp u r i t y ．S of a ri t i sq u i t ea p r o p e r w a y t o e x t r a c tD N A f r o mW a m p e e ．2 ．T h e t e c h n o l

11、o g i c a ls y s t e mo f I S S R —P C R r e a c t i o n o fW a m p e e h a sb e e nb u i l tu p ．I nt h e 2 0 p Lr e a c t i o ns y s t e m ，t h e r e i s 1 ．5 U o fT a q D N A e n z y m e ，0 ．4l a m o l ／Lo fp r i m e

12、r ，3 0 0I ．t m o l ／Lo f d N T P ，3 0 n g ／r e a c t i o no f t e m p l a t eD N A ，2 ．0 p L 1 0 ×B u f f e rs o l u t i o n ．A c c o r d i n g t o t h es y s t e m ，t h ee x p e r i m e n t a l s t e p sa r e a s f

13、 o l l o w s ．5 r a i np r e d e n a t u r a t i o n a t9 4 。C ，3 0s e c o n d s d e n a t u r a t i o na t9 4 “ C ，6 0s e c o n d s a n n e a l i n g ，9 0s e c o n d s e x t e n s i o n a t7 2 “ C ．T h e c y c l e r e p

14、 e a t sf o r t yt i m e sa n d e n d si n 10 m i n e x t e n t i o na t7 2 ℃．3 ．At o t a lo f15I S S Rp r i m e r sw e r ee m p l o y e do n4 0i n d i v i d u a l so fc u l t i v a t e dW a m p e e f r o m9 6p r i m e r

15、 s ，a n d16 5s c o r a b l ea m p l i f i e dp o l y m o r p h i cw e r ed e t e c t e d ，o fw h i c h 10 0 ( 6 0 ．6 ％) w e r ep o l y m o r p h i cl o c i ．A n dt h i sr e s e a r c h f o u n d t h a tp r i m e r sc o n