三角梅(bongainvilleabrasiliensisraeusch.)種質(zhì)資源的issr分析

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文三角梅（Bongainvillea Brasiliensis Raeusch.）種質(zhì)資源的ISSR分析姓名：黃彥晶申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：園林植物與觀賞園藝指導(dǎo)教師：吳少華;李房英20100401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位 三角梅種質(zhì)資源I S S R 分析 A b s t r a c tA b s t r a c tB o u g a i n v i l l e a ( B o n g a i n v i l l e

2、 aB r a s i l i e n s i sR a e u s c h ．) ，b e l o n g i n g t oB o u g a i n v i l l e ag e n u s o f N y c t a g i n a c e a e ，i s 鋤e v e r g r e e nc l i m b i n g s h r u bw i d e l y c u l t i v a t e d i ns u b t

3、r o p i c a la n dt r o p i c a r e a s ．T h e r ea r eo v e ro n eh u n d r e di n d i v i d u a l s ．T h eg e n e t i cb a c k g r o u n do f t h em o s ti n d i v i d u a l s i sc o m p l e x ，a n dS Of a r , t h er e

4、 s e a r c h e so n g e n e t i cr e l a t i o n s h i po f b o u g a i n v i l l e a a r e l i m i t e d ．T op r o v i d e s c i e n t i f i ce v i d e n c e s a n d a s s i s to nq u a l i t y c h o s e n ，c r o s s b

5、r e e d i n g p a r e n t s s e l e c t i o n a n d f i n e v a r i e t y b r e e d i n g o fb o u g a i n v i l l e ao nm o l e c u l a rl e v e l ，I S S Rm o l e c u l a rm a r k e rt e c h n o l o g yw a su s e dt oi

6、n v e s t i g a t e t h e g e n e t i c d i v e r s i t y a n d g e n e t i c r e l a t i o n s h i p o f 6 8 b o u g a i n v i l l e ai n d i v i d u a l s i nt h i ss t u d y ．T h em a i n r e s u l t sw e r e i n d i

7、c a t e d a sf o l l o w s ：1 ．T or e s o l v et h ei n f l u e n c eo f p i g m e n t ，p o l y p h e n o la n d p o l y s a c c h a r i d eo nt o t a lD N A e x t r a c t i o n ，4d i f f e r e n tm e t h o d s w e r e e

8、 m p l o y e da n d c o m p a r e d i nt h i ss t u d y ．T h er e s u l t s s h o w e d t h a tt h e i m p r o v e dC T A Bm i n i m e t h o dW a st h ef i t t e s t m e t h o d f o rb o u g a i n v i l l e aD N A e x t

9、r a c t i o n ，a n dt h ec o n c e n t r a t i o na n dp u r i f i c a t i o no fD N A w e r ea l ls u i t a b l ef o r I S S Ra n a l y s i s ．2 ．F i r s t l y , t h e I S S R - P C Rr e a c t i o ns y s t e mW a so p t

10、 i m i z e d ，a n dt h e nI S S R - P C Ra m p l i f i c a t i o n r e a c t i o n p r o t o c o l f o r b o u g a i n v i l l e a W a s b u i l t i n t h i s s t u d y ．T h ea m p l i f i c a t i o n r e a c t i o nW a

11、sd o n ei na 2 0p L v o l u m ec o n s i s t i n go f1 ．0U T a q e n z y m e ，0 ．3 I l m o l ／Lp r i m e r s ，2 5 0 } t m o l ／Ld N T P s ，2 0n gt e m p l a t eD N A a n d2I ．t L10 x B u f f e r ．T h e P C R p r o t o c

12、o lc o n s i s t e do f a s i n g l ed e n a t u r a t i o ns t e p o f 5 m i n a t9 4 。C ，f o l l o w e db y3 4 c y c l e so f 6 0S d e n a t u r a t i o na t9 4 “ ( 2 ，6 0 Sa n n e a l i n ga to p t i m i z e d t e m p

13、 e r a t u r e ，2m i n e x t e n s i o n a t7 2 ℃．w i t ha f i n a l7 m i n i n c u b a t i o n a t7 2 ℃a n d c o n s e r v a t i o na t4 ℃．T h ea n n e a l i n gt e m p e r a t u r e W a s o p t i m i z e d b y T - g r

14、a d i e n t P C R ．T h e a g a r o s e g e le l e c t r o p h o r e s i sr e s u l t s i n d i c a t e dt h a tt h e b a n d s w e r e d i s t i n c t ．I tW a s c o n c l u d e d t h a tt h eP C R a m p l i f i c a t i o

15、 nr e a c t i o np r o t o c o lw a s s u i t a b l ef o rI S S R a n a l y s i s ．3 ．F o u r t e e nI S S R p r i m e r sw e r eu s e di nt h e I S S Ra n a l y s i so f 6 8b o u g a i n v i l l e ai n d i v i d u a l s

16、 ．At o t a lo f 19 5I S S R b a n d s w e r e s c o r e d ，c o r r e s p o n d i n g t ot h e p o l y m o r p h i cb a n d sw e r e18 2 ，a n d t h ep e r c e n t a g eo f p o l y m o r p h i c w a s 9 3 ．3 ％．T h ed a t a