菹草p.crispus體細(xì)胞遺傳學(xué)的初步研究

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文菹草（P.Crispus）體細(xì)胞遺傳學(xué)的初步研究姓名：張成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：龍良啟2002.5.1羔蘭! 墨! ! 簍竺! 堡塑墮望堡竺竺翌生嬰壅S t u d i e s o n s o m a t i cc e l l g e n e t i c s o f 只c r i s p u sP o s t g r a d u a t e ：Z h a n gC h e n gS u p e

2、 r v i s o r ：P r o f ．L o n gL i a n g q iT h e F i s h e r i e s C o l l e g e ，H u a z h o n g A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t yW u h a n ，4 3 0 0 7 0 ．M a y , 2 0 0 2A B S T R A C TI nt h i sp a p e r , t h

3、ee f f e c t so fs e v e r a le c o l o g i c a lf a c t o r so ns p r o u f i o no f 矗e s h t u r i o n ，p r o t o p l a s t i s o l a t i o n c o n d i t i o n s f r o m P c r i s p u s m e s o p h y l l a n d t h e a

4、p p r o p r i a t e o p e r a t i o ns e q u e n c e so f t h em e t h o do fo b s e r v i n gt h e e h r o m o s o m e so fs o m a t i c c e l l a n dt h ek a r y o t y p ea n a l y s i so f P c r i s p u s w e r es t u

5、 d i e d ．T h e r e s u l t s s h o w e d ：I ．T h e b e s ts p r o u t i o nt e m p e r a t u r eo ff r e s ht u r i o no f P c r i s p u sw a s1 5 “ C ．T h es p r o u t i o nr a t e f e l l o b v i o u s l ya st h et e

6、m p e r a t u r er i s i n gf r o m 15t o 3 5 ℃．I tc u r t a i l e dt h er e s tp e r i o do ff r e s ht u r i o n t ot r e a t e dw i t l lN A A ．T h e s p r o u t i o ns p e e dp u t o nq u i c k l y a st h ec o n c e

7、n t r a t i o no ft r e a t e dN A A r i s i n gf r o mz e r ot o8 m g ／La n d p mo n l i t t l ew h e nt h eN A A c o n c e n t r a t i o nw a sm o r et h a n8 m g ／L ．I l l u m i n a t i o no f1 2 h ／d d i di nt h i s

8、w a yt o o ．H i 曲i o nc o n c e n t r a t i o n ( m o r et h a n1 ／4 C P W ) a n d e x t r e m ep H v a l u e ( 1 e s st h a n 4 o rm o r e t h a n9 ) r e s t r a i n e dt h e s p r o u t i o no ff r e s ht u r i o n ．R

9、r i s i n g o f t h e t e m p e r a t u r e a d d e d t h er e s t r a i n t ．2 ．T h ee 丘b c t so f f a c t o r so n p r o t o p l a s ti s o l a t i o n f r o m P c r i s p u sm e s o p h y l l w e r es t u d i e d ．T h

10、 e e n z y m e s o l u t i o n 謝t 1 13 ％C e l l u l a s e ，0 ．5 ％P e c t i n a s ea n d O ．6 ～O ．6 5 m o l ／Lm a n n t a l ，10 hi n c u b a t i o n p e r i o d a n d 2 5 ‘C w e r e m o s ts u i t a b l ef o r p r o t o p

11、 l a s ti s o l a t i o n f r o m P c r i s p u sm e s o p h y l l ．I n t h i sw a y ．y i e l d so f 3 ．7 4 x 1 0 0 p r o t o p l a s t s ／g ‘F Ww i t h a c t i v i t yo f 7 2 ．5 ％w e r ea c h i e v e d ．A c t i v i t yo

12、 f p r o t o p l a s t s f e l la st h ee n z y m e c o n c e n t r a t i o ni n c r e a s i n ga n d t h ei n c u b a t i o n p e r i o dp r o l o n g i n g ．H i g l la c t i v i t yp r o t o p l a s t sw e r e a c h i

13、e v e di nl o w e r c o n c e n t r a t i o ne n z y m e s o l u t i o n ，b u t t h ey i e l d w a sp o o r ．3 ．T h e b e s tm e t h o do fo b s e r v i n gc h r o m o s o m e so f P c r i s p u sw a st h eW a l lD e g r

14、 a d a t i o nH y p o t o n i cM e t h o d ．I t w a s ac r i t i c a l p r o c e d u r e t h a t t h e r o o t t i p s o f P ．c r i s p 塒w e r ep r e t r e a t e d b yt h e m i x t u r e s o l u t i o n c o n t a i n i n

15、 g 0 ．1 ％C o l c h i c i n e a n d t h e S a l T l e v o l u m e0 ．0 0 2 m o l ／L8 - - H y d r o x y q u i n o l i n e f o r 4t o6 h o u r s a t1 5 “ C ．4 ．T h es o m a t i c e e l lc h r o m o s o n e o f P c r i s p u