十一、哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)

1、122十一、哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)十一、哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)InVivoMammalianBoneMarrowCellChromosomeAberrationTest1范圍范圍本規(guī)范規(guī)定了哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)的基本原則、要求和方法。本規(guī)范適用于檢測(cè)化妝品原料及其產(chǎn)品的遺傳毒性。2規(guī)范性引用文件規(guī)范性引用文件OECDGuidelinesfTestingofChemicals（No.475April1997）3試

2、驗(yàn)?zāi)康脑囼?yàn)?zāi)康谋驹囼?yàn)是一項(xiàng)致突變性試驗(yàn)，檢測(cè)整體動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變，以評(píng)價(jià)受試物致突變的可能性。4定義定義染色體型畸變(Chromosometypeaberration)：染色體結(jié)構(gòu)損傷，表現(xiàn)為在兩個(gè)染色單體的相同位點(diǎn)均出現(xiàn)斷裂或斷裂重組的改變。染色單體型畸變(Chromatidtypeaberration)：染色體結(jié)構(gòu)損傷，表現(xiàn)為染色單體斷裂或染色單體斷裂重組的損傷。染色體數(shù)目改變(Numericalfypeaberration)

3、：哺乳動(dòng)物細(xì)胞正常染色體數(shù)目的改變。5試驗(yàn)基本原則試驗(yàn)基本原則使哺乳動(dòng)物（如大鼠或小鼠）經(jīng)口或其它適宜途徑染毒，動(dòng)物處死前用細(xì)胞分裂中期阻斷劑處理，處死后制備骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本，分析染色體畸變。6試驗(yàn)方法試驗(yàn)方法6.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)環(huán)境：選用健康成年大鼠或小鼠，每組每種性別至少5只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房應(yīng)符合國(guó)家相應(yīng)規(guī)定。6.2受試物6.2.1受試物配制：固體受試物應(yīng)溶解或懸浮于適合的溶劑中，并稀釋至一定濃度。液體受試物可直接使用或予以

4、稀釋。受試物應(yīng)在使用前新鮮配制，否則就必須證實(shí)貯存不影響其穩(wěn)定性。6.2.2溶劑的選擇：溶劑在所選用濃度下，不引起毒性效應(yīng)，不與受試物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。首選為水溶性溶劑。6.2.3劑量設(shè)置：應(yīng)進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)以選擇最高劑量。當(dāng)有毒性時(shí)，可以引起死亡或者抑制骨髓細(xì)胞有絲分裂指數(shù)（50%以上）為指標(biāo)確定最高劑量。在第一次采集樣品時(shí)，需設(shè)置3個(gè)可供分析的劑量，在第二次采集樣品時(shí)，則僅需設(shè)置最高劑量組。如果一次劑量為2000mgkg體重時(shí)仍未引起毒性效應(yīng)

5、，則只設(shè)2000mgkg體重劑量組。6.3對(duì)照：在每項(xiàng)試驗(yàn)中，對(duì)每種性別均應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。除不使用受試物外，其它處理與受試物組一致。6.3.1陰性對(duì)照：除設(shè)溶劑對(duì)照（即僅含溶劑）外，如果沒(méi)有文獻(xiàn)資料或歷史性資料證實(shí)所124(5)試驗(yàn)條件和方法：染毒途徑和染毒方案、細(xì)胞毒性測(cè)定方法、所用的細(xì)胞分裂中期阻斷劑及其劑量和采樣時(shí)間、簡(jiǎn)述制備染色體的方法；(6)觀察和分析的細(xì)胞數(shù)；(7)畸變類型和數(shù)量及畸變率；(8)結(jié)論。8結(jié)果解釋結(jié)