聯(lián)合檢測(cè)eb病毒相關(guān)抗體和抗原對(duì)診斷鼻咽癌的價(jià)值_羅耀凌

1、《癌癥》ChineseJournalofCancer，2009，28（1）：96－99臨床研究［Abstract］BackgroundObjective：Withthedevelopmentofmolecularbiologyinrecentyears，manyindexesfdetectingEpsteinBarrvirus（EBV）havebeendevelopedThisstudywastoevaluatethediagnosti

2、cvalueofcombineddeterminationofEBVrelatedantibodiesantigens，includingVCAIgA，EAIgA，EBVDNaseantibodyEBVDNA，indiagnosingnasopharyngealcarcinoma（NPC）Methods：Serumplasmasamplesfrom160untreatedNPCpatients76healthydonswerecolle

3、ctedVCAIgAEAIgAintheserumsamplesweredetectedbyimmunoenzymestainingmethodRajicellswerestimulatedbythobutanoicacidcrotonoiltodetectEBVDNaseantibodyThecontentofEBVDNAintheplasmasampleswasdetectedbyrealtimefluescencequantita

4、tivepolymerasechainreaction（RQPCR）ThediagnosticvaluesoftheindexesfNPCwereevaluatedResults：ThesensitivityspecificityfdiagnosingNPCwere900％895％fVCAIgA，750％947％fEAIgA，763％908％fEBVDNaseantibody，688％882％fEBVDNA，988％842％fcombi

5、neddeterminationThepositiveratesofVCAIgAEAIgAhadnorelationshipwithclinicalstageofNPC（P＞005）；nevertheless，thepositiveratesofEBVDNaseantibodyEBVDNAwererelatedwithclinicalstage（P＜005）Conclusions：ThesensitivityofVCAIgAthespe

6、cificityofEAIgAarethehighestwhiledetectingsolelyCombineddeterminationcouldimprovethediagnosticsensitivityaccuracyfNPCEBVDNaseantibodyEBVDNAcouldbehelpfultoevaluatethecourseofdiseaseclassifytheclinicalstageofNPCKeywds：nas

7、opharyngealneoplasm，diagnosis，EBVDNaseantibody，EpsteinBarrvirusDNA，realtimefluescencequantitativePCR【摘要】背景與目的：近年來(lái)隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，提供了多項(xiàng)EB病毒（EpsteinBarrvirus）相關(guān)的檢測(cè)指標(biāo)。本研究通過(guò)同時(shí)檢測(cè)EB病毒VCAIgA、EAIgA、EBV特異性DNA酶（EBVDNase）抗體、EB病毒DNA（EBVD

8、NA），評(píng)價(jià)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷鼻咽癌的價(jià)值。方法：收集160例治療前的鼻咽癌患者和76例健康成人的血清和血漿，應(yīng)用免疫酶染色法檢測(cè)血清VCAIgA、EAIgA；用正丁酸與巴豆油激發(fā)Raji細(xì)胞方法檢測(cè)EBVDNase抗體；用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（realtimefluescencequantitativePCR，RQPCR）分析血漿EBVDNA，評(píng)估其在診斷鼻咽癌中的價(jià)值。結(jié)果：?jiǎn)雾?xiàng)檢測(cè)時(shí)對(duì)鼻咽癌患者診斷的敏感性和特異性分別為：VCAI

9、gA900％、895％，EAIgA750％、947％，EBVDNase抗體763％、908％，EBVDNA688％、882％。聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性分別為988％和842％。VCAIgA、EAIgA陽(yáng)性率與臨床分期無(wú)關(guān)（P﹥005），各臨床分聯(lián)合檢測(cè)EB病毒相關(guān)抗體和抗原對(duì)診斷鼻咽癌的價(jià)值羅耀凌1，2，歐國(guó)萍1，3，池沛冬1，2，梁永能1，2，劉宇輝1，2，黃馬燕1，4CombineddeterminationofEpsteinBar

10、rvirusrelatedantibodiesantigensfdiagnosisofnasopharyngealcarcinomaYaoLingLuo，1，2GuoPingOu，1，3PeiDongChi，1，2YongNengLiang，1，2YuHuiLiu1，2MaYanHuang1，41華南腫瘤學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州5100602中山大學(xué)腫瘤防治中心檢驗(yàn)科，廣東廣州5100603中山大學(xué)腫瘤防治中心鼻咽癌科，廣東廣州510

11、0604中山大學(xué)腫瘤防治中心病理科，廣東廣州5100601StateKeyLabatyofOncologyinSouthChina，Guangzhou，Guangdong，510060，PRChina2DepartmentofLabaty，CancerCenter，SunYatsenUniversity，Guangzhou，Guangdong，510060，PRChina3DepartmentofNasopharyngealCarcin

12、oma，CancerCenter，SunYatsenUniversity，Guangzhou，Guangdong，510060，PRChina4DepartmentofPathology，CancerCenter，SunYatsenUniversity，Guangzhou，Guangdong，510060，PRChina通訊作者：羅耀凌Crespondenceto：YaoLingLuoTel：862087343438Fax：862087

13、343198Email：luoyaolingluo＠126com收稿日期：20080512修回日期：20080703962結(jié)果21EB病毒四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)鼻咽癌的診斷價(jià)值76例健康對(duì)照中四項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性的例數(shù)分別為：VCAIgA8例，EAIgA4例，EBVDNase抗體7例，EBVDNA9例；四項(xiàng)指標(biāo)中至少一項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性者12例。從表1可見，單獨(dú)應(yīng)用一項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)鼻咽癌患者時(shí)，以VCAIgA的敏感度最高（900％），EAIgA的特異

14、性最高（947％）。聯(lián)合四項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，敏感度和準(zhǔn)確度分別提高到988％（158／160）和941％（222／236）；而特異度變化不大。IndexVCAIgAEAIgAEBVDNaseantibodyEBVDNACombinationSensitivity（％）900（144／160）750（120／160）763（122／160）688（110／160）988（158／160）Specificity（％）895（68／76）947（72

15、／76）908（69／76）882（67／76）842（64／76）Accuracy（％）898（212／236）814（192／236）809（191／236）750（177／236）941（222／236）Positivepredictivevalue（％）947（144／152）968（120／124）946（122／129）924（110／119）929（158／170）Negativepredictivevalue（％）810

16、（68／84）643（72／112）645（69／107）573（67／117）970（64／66）表1EB病毒四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)鼻咽癌的診斷價(jià)值Table1DiagnosticvaluesofthefourEpsteinBarrvirus（EBV）detectionindexesfnasopharyngealcarcinoma（NPC）22不同臨床分期患者的EB病毒四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的比較由表2可見，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病例中VCAIgA和EAIg

17、A陽(yáng)性率之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005）。EBVDNase抗體陽(yáng)性率在Ⅰ期與Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期；Ⅱ期與Ⅳ期間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。EBVDNA陽(yáng)性率在Ⅰ期、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜001）。臨床分期越晚，EBVDNA水平（拷貝數(shù)）越高（KruskalWallis檢驗(yàn)，P＝0005）。TNMstageⅠⅡⅢⅣCases8277253VCAIgA（％）875（7／8）926（25／27）875（63／72）925

18、（49／53）EAIgA（％）500（4／8）667（18／27）736（53／72）849（45／53）EBVDNaseantibody（％）125（1／8）630（17／27）792（57／72）887（47／53）EBVDNA（％）250（2／8）481（13／27）736（53／72）792（42／53）MedianEBVDNAlevel（copies／mL）14602840079350137000表2不同臨床分期鼻咽癌患者的E

19、B病毒四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性率和EBVDNA中位水平Table2ThepositiveratesoffourEBVdetectionindexesthemedianlevelofEBVDNAinNPCpatientsatdifferentclinicalstages3討論鼻咽癌是中國(guó)南方人群常見的惡性腫瘤，雖然其具體發(fā)病機(jī)制目前仍然不明，但大量研究認(rèn)為EBV與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，用帶EBV基因的Raji細(xì)胞經(jīng)激活后抗原表達(dá)譜來(lái)看，其中

20、至少含有EAD、EAR、EBV相關(guān)的DNA酶、DNA多聚酶、胸腺激酶等。絕大多數(shù)鼻咽癌患者血清中有抗EBV各種抗原的抗體存在，鼻咽癌的血清學(xué)診斷應(yīng)朝著多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用的方向探索［2，3］。近年來(lái)陸續(xù)有報(bào)道指出［4，5］，鼻咽癌患者血漿中存在可以檢測(cè)到的腫瘤來(lái)源的EBVDNA，且含量變化與腫瘤病情、療效、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究同時(shí)檢測(cè)EBV相關(guān)抗原和抗體，評(píng)價(jià)該四項(xiàng)檢測(cè)對(duì)鼻咽癌診斷的價(jià)值，我們發(fā)現(xiàn)，單項(xiàng)檢測(cè)中，VCAIgA、EAIgA、E

21、BVDNase抗體、EBVDNA敏感度分別為：900％、750％、763％和688％，與以往的報(bào)道［3，6，7］相一致，以VCAIgA的敏感度最高，EAIgA的特異性最好，與張昌卿等［3］報(bào)道的結(jié)果一致。而當(dāng)四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，敏感度可達(dá)988％，準(zhǔn)確度提高到941％，而特異性無(wú)明顯降低。我們認(rèn)為抗體的形成是針對(duì)EBV編碼的抗原，鼻咽癌組織中的EBV可以進(jìn)入血循環(huán)中，既然在血循環(huán)中可以檢測(cè)到EBV的DNA，反映出血清也同時(shí)出現(xiàn)了EBV編