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1、實(shí)驗(yàn)九實(shí)驗(yàn)九脂肪酸β脂肪酸β氧化氧化目的要求:目的要求:(1)了解脂肪酸的β氧化作用。(2)掌握測(cè)定β氧化作用的方法和原理。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理:在肝臟中,脂肪酸經(jīng)β氧化作用生成乙酰輔酶A。2分子乙酰輔酶A可縮合生成乙酰乙酸。乙酰乙酸可脫羧生成丙酮,也可還原生成β羥丁酸。乙酰乙酸、β羥丁酸和丙酮總稱為酮體。本實(shí)驗(yàn)用新鮮肝糜與丁酸保溫,生成的丙酮在堿性條件下,與碘生成碘仿。反應(yīng)式如下:2NaOHI2─→NaOINaIH2OCH3COCH33N
2、aOI─→CHI3(碘仿)CH3COONa2NaOH剩余的碘,可以用標(biāo)準(zhǔn)硫代硫酸鈉滴定。NaOINaI2HCl─→I22NaCl2H2OI22Na2S2O3─→Na2S4O62NaI根據(jù)滴定樣品與滴定對(duì)照所消耗的硫代硫酸鈉溶液體積之差,可以計(jì)算由丁酸氧化生成丙酮的量。試劑和器材試劑和器材一、試劑一、試劑0.1%淀粉溶液;0.9%氯化鈉溶液;15%三氯乙酸溶液;10%氫氧化鈉溶液。10%鹽酸溶液:濃鹽酸一般濃度35%~37%,取濃鹽酸27
3、7.8mL定容到1000mL。0.5molL丁酸溶液:取5mL丁酸溶于100mL0.5molL氫氧化鈉溶液中。0.1molL碘溶液:稱取12.7g碘和約25g碘化鉀溶于水中,稀釋到1000mL,混勻,用標(biāo)準(zhǔn)0.05molL硫代硫酸鈉溶液標(biāo)定。標(biāo)準(zhǔn)0.01molL硫代硫酸鈉溶液:臨用時(shí)將已標(biāo)定的0.05molL硫代硫酸鈉溶液稀釋成0.01molL。115molLpH7.6磷酸鹽緩沖液:115molL磷酸氫二鈉溶液86.8mL與115mol
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