卡托普利對性2型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護作用研究

1、卡托普利對實驗性卡托普利對實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護作用研究型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護作用研究董世芬1，洪纓1，靳洪濤2，孫建寧1?（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京100102；2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所新藥安全評價研究中心，北京100050）【摘要摘要】目的目的研究卡托普利對實驗性2型糖尿病心肌?。═2DC）模型動物心臟保護作用和可能機制。方法方法以高糖脂飼料負荷30mgkg劑量鏈脲佐菌素一次性腹腔注

2、射建立T2DC大鼠模型，觀察卡托普利45mgkg灌胃給藥6周對模型動物血糖和血脂水平，心臟功能和結(jié)構(gòu)變化，心肌脂肪酸含量以及心肌組織過氧化物增殖體激活受體α（PPARα）和葡萄糖轉(zhuǎn)運體4（GLUT4）基因表達等指標的影響。結(jié)果結(jié)果與T2DC大鼠模型比較，卡托普利給藥后，左心室收縮壓、左心室最大收縮速率、左心室最大舒張速率的絕對值和心輸出量分別顯著增加15%、77%、52%和54%（P0.05或P0.01）；室間隔厚度降低40%（P0.0

3、01）；血漿糖化血紅蛋白和心肌組織游離脂肪酸含量分別降低31%和24%（P0.01，P0.05）；心肌組織PPARα基因表達顯著降低（P0.05），GLUT4基因表達顯著增加（P0.05）。結(jié)論結(jié)論卡托普利可以顯著改善T2DC模型動物心臟功能、抑制心室重構(gòu)，其作用機理可能同調(diào)節(jié)與能量代謝相關(guān)基因表達、減輕心臟內(nèi)脂肪積聚有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞關(guān)鍵詞】2型糖尿病心肌??；卡托普利；心臟功能；心臟結(jié)構(gòu)；能量代謝【中圖分類號中圖分類號】R332Prote

4、ctiveeffectsofcaptopriloncardiacfunctionstructureinexperimentaltype2diabeticcardiomyopathyratmodelDONGShifen1HONGYing1JINHongtao2SUNJianning1(1.SchoolofChineseMateriaMedicaBeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing100102

5、China2.DepartmentofEvaluationofDrugSafetyInstituteofMateriaMedicaChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollegeBeijing100050China)【Abstract】ObjectiveTostudyeffectsofcaptopriloncardiacfunctionstructureintheexpe

6、rimentaltype2diabeticcardiomyopathy(T2DC)ratmodel.MethodsTheexperimentaltype2DCmodelratswereinducedbyfeedingwithhighsucrosefatdietintraperitoneal(i.p.)injectionwith30mgkgofstreptozotocin.Themodelratswereintragastricgiven

7、withcaptoprilatthedoseof45mgkgfsixmonthstotally.Atthethirteenthweektheparametersofcardiacoutput(CO)leftventricularsystolicpressure(LVSP)leftventricularenddiastolicpressure(LVEDP)themaximumrateofmyocardialcontraction(dpdt

8、max)themaximumrateofmyocardialdiastole(dpdtmax)weredetectedusingMP150polygraphphysiologicalsignalrecdertoevaluatecardiacfunction.Thethicknessofinterventricularseptal(IST)left[基金項目]國家自然科學(xué)基金資助項目（編號：30840103），北京中醫(yī)藥大學(xué)青年教師專項計

9、劃（編號：2012QNJSZX006），中藥防治重大疾病的藥理學(xué)研究，北京市中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點實驗室。[作者簡介]董世芬（1983），女，博士，講師，研究方向：中藥防治心腦血管疾病研究，tedong4444@。[通訊作者]孫建寧（1952），女，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥防治重大疾病創(chuàng)新藥物研究，jn_sun@。京科澳協(xié)力飼料有限公司【SCXK（京）20050007】；鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）和卡托普

10、利（captopril，Cap）由Sigma公司提供，批號分別為38K152和77K1623。葡萄糖、糖化血紅蛋白（glycatedhemoglobinA1c，HbA1c）、總膽固醇（totalcholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、游離脂肪酸（nonesterifiedfattyacids，NEFA）和肌酸激酶（creatinekinase，CK）生化測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號20

11、090601。主要realtimePCR試劑：TRIzol試劑，無RNA酶的水，無RNA酶的糖原，10000Sybergreen，Invitrogenlifetechnologies提供，美國；RNA酶抑制劑，MMLV反轉(zhuǎn)錄酶，10RT緩沖液（250mMTrisHCl，pH8.3，200mMKCl，40mMMgCl2，5mMDTT），Epicentrebiotechnologies提供，美國；2.5mMdNTP混合液（dATP，dGTP

12、，dCTP和dTTP各2.5mM），HyTestLtd.提供，美國；Taq聚合酶，Promega提供；Rom9，上海生工生物工程有限公司提供；100bpDNALadder，天根生化科技（北京）有限公司提供。過氧化物增殖體激活受體α（peroxisomeproliferatactivatedreceptαPPARα）引物信息為5ATTTGCCAAGGCTATCCCA3（正向），5CAGCATCCCGTCTTTGTTCA3（反向），葡萄糖轉(zhuǎn)

13、運體4（glucosetranspter4，GLUT4）引物信息為5TCCTTTCCTCGCAGCACTT3（正向）和5CCACAGCCTAGCCACAACAC3（反向），甘油三磷酸脫氫酶（glyceraldehydephosphatedehydrogenase，GAPDH）引物信息為5GGAAAGCTGTGGCGTGAT3（正向）和5AAGGTGGAAGAATGGGAGTT3（反向）。1.3主要實驗儀器主要實驗儀器紫外分光光度計：AG

14、ILENT8453，AgilentTechologies，德國；BiopacSystemMP150，BiopacSystemInc.，美國；GeneAmpPCRSystem9700，AppliedBiosystems，美國；TaKaRaPCRThermalCycler，大連寶生物工程有限公司；DYY8型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀，上海琪特分析儀器有限公司提供；H61微型電泳槽，上海精益有機玻璃制品儀器廠提供；RotGene3000RealtimeP

15、CR儀，CbettResearch提供，澳大利亞；引物設(shè)計軟件：Primer5.0，Rotgene6.0，CbettResearch提供，澳大利亞。1.4實驗方法實驗方法1.4.1實驗動物分組與處理實驗動物分組與處理Wistar大鼠45只，按體重隨機取15只作為正常對照組（control），常規(guī)飼養(yǎng)；另外30只大鼠喂飼高糖脂飼料，每2周監(jiān)測血脂水平，確認血脂明顯升高后（約6周），按照30mgkg劑量一次性腹腔注射（i.p.）STZ（以檸

16、檬酸檸檬酸鈉緩沖液稀釋，pH4.5，4℃配制，隨配隨用），control大鼠i.p.同體積檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液。72h后，測定血糖，以禁食12h血糖≥7.8mmolL為是糖尿病模型成功標準，24只動物血糖合格，按血糖水平隨機分為2型糖尿病心肌病模型組（T2DC）、卡托普利45mgkg治療組（T2DCCap），每組12只。藥物以0.5%羧甲基纖維素鈉（CMCNa）混懸，灌胃給藥開始于注射STZ72h后，給藥容量為1ml100g體重，每日一