松阿扁葉蜂ssr

1、松阿扁葉蜂松阿扁葉蜂SSRSSR摘要：以ｓｄｓ－蛋白酶ｋ法提取的松阿扁葉蜂（ａｃａｎｔｈｏｌｙｄａｐｏｓｔｉｃａｌｉｓｍａｔｓｕｍｕｒａ）基因組ｄｎａ為模板，利用ｌ１６（４５）正交設(shè)計對影響松阿扁葉蜂ｓｓｒ－ｐｃｒ反應的主要參數(shù)ｄｎａ模板、ｔａｑｄｎａ聚合酶、ｍｇ２＋、引物和ｄｎｔｐｓ進行優(yōu)化。結(jié)果表明，松阿扁葉蜂ｓｓｒ－ｐｃｒ最優(yōu)的反應體系為２５μｌ體系中含１.00ｕｔａｑｄｎａ聚合酶、３００ｍｍｏｌ／ｌｍｇ２＋、３７５ｍｍｏｌ／ｌｄ

2、ｎｔｐｓ、２５００ｎｇ／μｌdna模板和１０００μｍｏｌ／ｌ引物。關(guān)鍵詞：松阿扁葉蜂（ａｃａｎｔｈｏｌｙｄａｐｏｓｔｉｃａｌｉｓｍａｔｓｕｍｕｒａ）；ｓｓｒ－ｐｃｒ；正交設(shè)計ａｂｓｔｒａｃｔ：ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｓｓｒ－ｐｃｒａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｕｓｉｎｇｇｅｎｏｍｉｃｄｎａｏｆａｃａｎｔｈｏｌｙｄａｐｏｓｔｉｃａｌｉｓwhichwasｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｓｄｓ－ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｋｍｅｔｈｏ

3、ｄａｓｔｅｍｐｌａｔｅ，ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ主選擇［７］、防治技術(shù)和預測預報［８，９］等方面，但關(guān)于該害蟲種群遺傳變異的研究至今未見報道。微衛(wèi)星（ｓｓｒ）分子標記具有分布廣泛、多態(tài)性高、穩(wěn)定性好、操作簡便、檢測技術(shù)簡單及共顯性遺傳等優(yōu)點，已被廣泛應用于物種資源遺傳多樣性研究、基因分子標記以及昆蟲遺傳多樣性研究等領(lǐng)域。但ｓｓｒ－ｐｃｒ反應結(jié)果易受反應體系中多種因素的影響，因此需要對其擴增體系進行優(yōu)化，然后才能進行后續(xù)的試驗分析

4、；此外，不同物種所需的ｓｓｒ－ｐｃｒ反應的最佳反應體系一般也不盡相同。在進行種群遺傳多樣性的研究中，運用正交設(shè)計方法［１０－１２］對影響松阿扁葉蜂ｓｓｒ－ｐｃｒ反應的各因素進行了優(yōu)化試驗，建立了一套適合松阿扁葉蜂ｓｓｒ－ｐｃｒ的反應體系，為應用該技術(shù)進行松阿扁葉蜂的種群遺傳多樣性分析打下基礎(chǔ)。１材料與方法１１材料１１１原料供試材料為２０１０年６月采自陜西省周至縣樓觀臺國家森林公園為害油松的松阿扁葉蜂幼蟲，樣品保存于體積分數(shù)為９５％的乙醇