TMEM8C、CTRP3基因?qū)2C12細(xì)胞成肌分化的調(diào)控作用研究.pdf

1、骨骼肌生長發(fā)育分子機理一直以來是農(nóng)業(yè)動物遺傳育種研究的重點內(nèi)容之一。解析骨骼肌生長發(fā)育分子機理，對改良農(nóng)業(yè)動物骨骼肌生長速度意義重大。已有的研究鑒定出了Pax3/7、Myf5、MyoD、MEF2等一大批調(diào)控骨骼肌生長發(fā)育的關(guān)鍵基因，基本揭示了骨骼肌生長發(fā)育的分子機理。但仍然還有很多未知的調(diào)控機制，一些調(diào)控骨骼肌發(fā)育的重要新基因，仍需要進(jìn)一步鑒定。最近的研究報道表明跨膜蛋白TMEM8C調(diào)控肌細(xì)胞融合，在本研究中，我們對新發(fā)現(xiàn)的與肌細(xì)胞融合

2、相關(guān)的TMEM8C基因以及與骨骼肌細(xì)胞分化密切相關(guān)的CTRP3基因的表達(dá)規(guī)律、轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及對成肌細(xì)胞分化的調(diào)控作用進(jìn)行了初步研究，取得的結(jié)果如下:
　　(1)RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)TMEM8C基因在骨骼肌組織中特異性表達(dá);Q-PCR檢測發(fā)現(xiàn)TMEM8C在C2C12成肌分化過程中呈上調(diào)表達(dá)規(guī)律:TMEM8C在C2C12增殖期表達(dá)水平很低;在分化1-4天，該基因呈逐漸上調(diào)表達(dá)趨勢;分化第6天的表達(dá)水平比第4天略有降低。
　　(2)

3、SiRNA干擾TMEM8C的表達(dá)會抑制C2C12細(xì)胞分化，并且改變C2C12早期分化的細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞拉長且呈現(xiàn)絲狀偽足。
　　(3)亞細(xì)胞定位結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TMEM8C在細(xì)胞增殖期定位于高爾基體上。
　　(4)刪除TMEM8C翻譯起始位點-3787bp和-3752bp兩個MyoD結(jié)合位點，TMEM8C啟動子活性降低，表明該基因受轉(zhuǎn)錄因子MyoD正調(diào)控;翻譯起始位點-287bp處的GA微衛(wèi)星結(jié)構(gòu)對TMEM8C的轉(zhuǎn)錄也具有一定的正調(diào)